AGREGADO DE ANTIOXIDANTES DURANTE LA ASPIRACIÓN FOLICULAR: EFECTO SOBRE EL DESARROLLO IN VITRO DE OVOCITOS PORCINOS.

LORENZO, MS.; LOMBARDO, DM.

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Jornada; V Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2015

Secretaría de Ciencias y Técnica - Escuela de Graduados (FVET-UBA)

AGREGADO DE ANTIOXIDANTES DURANTE LA ASPIRACIÓN FOLICULAR: EFECTO SOBRE EL DESARROLLO IN VITRO DE OVOCITOS PORCINOS. LORENZO, MARÍA SOLEDAD; LOMBARDO, DANIEL MARCELO Cátedra de Histología y Embriología-INITRA,FCV UBA Un ambiente redox balanceado es importante para la calidad ovocitaria. La acumulación de especies reactivas derivadas del oxígeno (ERO) y la disminución de los niveles de antioxidantes están involucrados en la inducción de apoptosis. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del agregado de un antioxidante, dimetiltiourea (DMTU) durante la aspiración folicular sobre los niveles ovocitarios de ERO, la maduración nuclear y citoplasmática y la apoptosis en ovocitos porcinos. El medio de aspiración y lavado en el control fue TCM 199 suplementado y en los tratamientos se agregó DMTU a 2mM y 20mM respectivamente. En ovocitos inmaduros, los niveles de ERO se determinaron por la intensidad de fluorescencia del 2?,7?-diclorodihidrodiacetato de fluoresceína valorada por análisis digital de la transmitancia. Luego de 44 h de maduración in vitro (MIV) se evaluó el porcentaje de maduración nuclear por la tinción con Hoechst 33342, apoptosis temprana por Anexina V y tardía por TUNEL. Se realizó la fecundación in vitro (FIV) con semen fresco a una concentración de 1x 106 espermatozoides/mL durante 6 h. Los presuntos cigotos se lavaron y cultivaron hasta el día 2 de desarrollo embrionario y se determinó el porcentaje de clivaje por observación bajo lupa estereoscópica. Los niveles ovocitarios de ERO disminuyeron en los dos grupos tratados con respecto al control (p≈0), sin encontrar diferencias estadísticamente significativas para el porcentaje de maduración nuclear. Respecto a la apoptosis, la tendencia indica que los tratamientos con DMTU la disminuyen con respecto al control quedando pendiente analizar estadísticamente los resultados de apoptosis, aumentando el tamaño muestral de la FIV para así poder verificar el efecto de DMTU sobre la maduración citoplasmática ovocitaria.