INVESTIGADORES
LOMBARDO Daniel Marcelo
congresos y reuniones científicas
Título:
Influencia De La Técnica De Obtención En La Presentación De Apoptosis En Complejos Cumulus-Ovocitos Porcinos Inmaduros
Autor/es:
LORENZO, MS.; LOMBARDO, DM.; FISCHMAN, ML.
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Jornada; Segundas Jornadas de Jóvenes Investigadores en Ciencias Veterinarias 2012; 2012
Institución organizadora:
Subsecretaría de Ciencia y Técnica. Facultad de Ciencias Veterinarias. UBA.
Resumen:
En la vida de la
hembra la mayoría de los folículos involucionan durante su desarrollo y el
proceso de atresia que sufren se debe al fenómeno de apoptosis. Existen
controversias sobre la manera en que la apoptosis afecta la capacidad de
desarrollo del ovocito. La técnica de obtención parecería influir en la calidad
de los Complejos Cumulus-Ovocito
(COCs). Se reporta en otras especies que por el método de slicing se recupera una
mayor cantidad de COCs por ovario, disminuyendo significativamente la tasa de
apoptosis temprana y tardía, respecto a la obtención por aspiración folicular. El
objetivo del este trabajo fue determinar la influencia de la técnica de
obtención en la presentación de apoptosis en COCs inmaduros de cerda. Los COCs fueron
recuperados de ovarios provenientes de hembras recientemente faenadas. En la
técnica de aspiración, se obtuvieron por punción aspiración de folículos de 3-8
mm (jeringa de 10 cc y aguja 18 G) y en la técnica de slicing, por cortes
sucesivos de la superficie ovárica (bisturí), siendo recuperados luego del
medio donde se encontraban sumergidos los ovarios. Sobre los COCs obtenidos por ambas técnicas se realizó la tinción
de AnnexinaV-IP (evaluación de apoptosis temprana) y TUNEL (evaluación de apoptosis tardía). Con aspiración folicular se
recuperaron en promedio 11,79 COCs por ovario, ascendiendo a 26,66 con slicing. Los ovocitos
obtenidos por aspiración presentaron un porcentaje mayor de apoptosis temprana
que los obtenidos por slicing (p=0,06); no hubo diferencias significativas en la
distribución de apoptosis temprana entre las células del cumulus. No se observó apoptosis tardía en ovocitos. La cantidad de células del cumulus con apoptosis tardía fue mayor
en los COCs recuperados por aspiración (p=0,002),
pero relativizando la cantidad de células positivas al área de cada COC, no se
encontraron diferencias significativas ya que los COCs obtenidos por slicing tenían
una menor superficie. La técnica de slicing resultó más rápida y se
aprovecharon mejor los ovarios de hembras prepúberes (folículos de menor tamaño).
Con la técnica de aspiración se evitó la punción de vasos y folículos
hemorrágicos, facilitando la recolección
y clasificación de los COCs. Es
necesario ampliar ésta comparación realizada en COCs inmaduros, por eso para
obtener una conclusión mas determinante, actualmente se está evaluando la
influencia de la técnica de obtención en los porcentajes de maduración in-vitro y si existe relación entre la
presencia de apoptosis para ambas técnicas antes y después de la maduración
