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body { background: #FFFFFF; margin: 0px; padding: 0px; } RECEPTORES DE NEUROTROFINAS (Trks) DE ALTA AFINIDAD EN EL OVARIO PORCINO (Sus scrofa domesticus). Gauna Añasco,LG, Di Matteo, AM, Gazzaneo, P, Lombardo, DM, Soñez, MC Cátedra de Histología y Embriología. Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad de Buenos Aires. Chorroarin 280. C.P. 1427. Buenos Aires. Argentina. gauna@fvet.uba.ar Las neurotrofinas juegan un rol fundamental en el desarrollo del ovario de los mamíferos, la oogénesis y la foliculogénesis. El ovario maduro de mamíferos sintetiza varias neurotrofinas (NTs), tales como el factor de crecimiento nervioso (NGF), neurotrofina 3 (NT-3), y neurotrofina 4/5 (NT-4/5) y expresa algunos receptores de NTs, (p75 NGFR, TrkB: receptor para NT 4/5 y BDNF; TrkA: receptor NGF). El objetivo del trabajo fue identificar los tipos celulares del ovario de cerdas adultas que expresan los receptores de alta afinidad TrkA y TrkB. Se obtuvieron ovarios de 12 cerdas Duroc Jersey adultas, de frigoríficos de la provincia de Buenos Aires. Las muestras fueron fijadas en solución de Bouin 12 hs. y se procesaron con la técnica histológica de rutina. Sobre cortes seriados de 5μm se aplicó método inmunocitoquímico indirecto (LSAB2® System-HRPL, K0675 Dako Labs), empleando anticuerpos policlonales de conejo anti-humano Trk A (dominio N terminal) y anti-ratón Trk B (dominio C terminal)(Santa Cruz Biotechnology, CA,USA), en dilución 1:100. Se incubaron con el anticuerpo primario en cámara húmeda durante 24 hs a 4ºC. Las siguientes incubaciones, con el anticuerpo secundario biotinilado y con la estreptavidina-HRP se efectuaron en cámara húmeda durante 15 min a temperatura ambiente. Para los lavados se empleó buffer fosfato salino (PBS) pH 7.4. Se realizaron controles negativos omitiendo la incubación con el antisuero primario. El complejo Ag-Ac se reveló con 0.003% 3.3 diaminobencidine tetrahidroclorure (DAB Chromogen DAKO), finalizando con leve contrastación con hematoxilina de Mayer, deshidratación y montaje. Células inmunomarcadas con TrkA y TrkB se detectaron en áreas de las tecas internas y externa de los folículos grandes (diámetro mayor de 10 mm) y en los folículos medianos (diámetro 5-8 mm); en algunas poblaciones celulares de la granulosa de folículos medianos y grandes; en el líquido folicular de folículos grandes y medianos; en la túnica adventicia y endotelio de algunas vénulas medulares; en tejido conectivo del intersticio medular, en zonas del epitelio superficial y tejido conectivo subyacente (seudoalbugínea); en células de los folículos atrésicos. Las células luteales presentaron inmunoreactividad exclusivamente con anti-TrkA. La localización observada de los receptores de NTs en el ovario de cerdas adultas sugiere que los factores de crecimiento NGF y BDNF participan en la foliculogénesis y regulan posiblemente otras funciones de este órgano en respuesta a los cambios cíclicos hormonales.

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