PERSONAL DE APOYO
MARCHI Maria Claudia
congresos y reuniones científicas
Título:
MICROPATRONES PROTEICOS COMO SUSTRATOS INTELIGENTES PARA LA ADHESIÓN CELULAR: DISEÑO Y FABRICACIÓN MEDIANTE TÉCNICAS DE LITOGRAFÍA
Autor/es:
CECILIA R. PRUDKIN SILVA; VANESA M. DOUNA; CATALINA VON BILDERLING; M. CLAUDIA MARCHI; LÍA I. PIETRASANTA
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XL Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2011
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biofísica
Resumen:
Las técnicas para la localización controlada de proteínas sobre superficies sólidas a escala micrométrica resultan de gran interés, en particular para el estudio de procesos biológicos. En los últimos años, han sido ampliamente utilizadas en la fabricación de sustratos inteligentes para el estudio de la adhesión celular. Estas interfases sintéticas han demostrado ser de gran utilidad ya que se ha encontrado que la adhesión celular es muy sensible a la densidad y la química de los ligandos en la superficie, así como a la geometría del micropatrón y la rigidez del sustrato1. En este trabajo describimos la puesta a punto de la fabricación de matrices para sellos blandos y la utilización de estos últimos en la técnica de impresión por microcontacto (µCP)2. La técnica consiste en la transferencia de moléculas desde un sello blando hacia un sustrato sólido por contacto entre ellos. Para la construcción de los sellos blandos, fabricamos una matriz de patrones micrométricos mediante Litografía por Haz de Electrones (EBL) sobre un sustrato de silicio recubierto por una película de PMMA (polimetilmetacrilato). Mediante spin-coating obtuvimos películas delgadas de PMMA de diferentes espesores, caracterizados por Microscopía de Fuerza Atómica (AFM), para lograr un control adecuado en la profundidad de la matriz. Optimizamos también la geometría de los patrones y los parámetros de la escritura por EBL. A partir de esta matriz, elaboramos los sellos blandos por moldeado del elastómero PDMS (polidimetilsiloxano). Presentamos dos estrategias para la impresión de proteínas con los sellos obtenidos: por microcontacto directo sobre vidrio o a través de moléculas funcionalizadas con un tiol sobre sustratos de oro. Para la proteína estreptavidina, evaluamos la calidad de los patrones resultantes en términos de homogeneidad y geometría mediante AFM y Microscopía Confocal de Fluorescencia.   1 Huang, J. et al, J. P. Nano Lett. 2009, vol.9, p.1111. 2 Ostuni E., Whitesides G.M., Ingber D.E., Chen C.S. Methods Mol. Biol. 2009, vol.522, p.183. Agradecimientos: ANPCyT, UBA, CONICET.