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CO-CULTIVO DE COMPLEJOS CUMULUS OVOCITO BOVINOS CON CÉLULAS DE GRANULOSA BOVINA: EFECTO SOBRE LA APOPTOSIS Y LA REANUDACIÓN MEIÓTICA OVOCITARIA MARURI A; LOMBARDO DM Cátedra de Histología y Embriología, INITRA, FVET, UBA La maduración in vitro (MIV) permite utilizar ovocitos inmaduros obtenidos de hembras vivas u ovarios de frigorífico, siendo ellos la materia prima para la producción in vitro de embriones. La adecuada selección ovocitaria y del ambiente en el cual se lleva a cabo la reanudación meiótica, no solo se refleja en los porcentajes de maduración nuclear sino tardíamente en el desarrollo de dichos ovocitos. El co-cultivo con células somáticas comenzó a utilizarse hace varias décadas para la MIV y el mejoramiento de la viabilidad y del desarrollo embrionario. Los sistemas utilizados son diversos con resultados variables e incluso contrapuestos. La evaluación de la apoptosis en el ovocito como indicador de calidad antes y después de la MIV es contradictoria. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto del co-cultivo con células de granulosa bovina de cultivo primario pasaje 1 (CPGB-1) sobre la maduración nuclear y la apoptosis ovocitaria. Las células de granulosa se obtuvieron por punción de folículos de ovarios con cuerpo lúteo, se criopreservaron y se sembraron 24 h previas a la MIV. Los complejos cumulus ovocito se obtuvieron por punción de folículos de ovarios bovinos de faena y se maduraron 22 h en dos grupos: 1) control y 2) co-cultivo con CPGB-1. Luego de la MIV los ovocitos se denudaron para determinar el estadío nuclear (tinción Hoechst 33342) y la apoptosis. La tinción con Anexina V-IP determinó apoptosis temprana y el ensayo TUNEL apoptosis tardía. El co-cultivo con CPGB-1 incrementó significativamente el porcentaje de maduración meiótica (85%) respecto del control (70%) (p

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