Phoshorylation of Acyl-CoA synthetase4 (ACSL4) in steroidogenic cells”

SMITH, EMILIA; PODESTÁ, ERNESTO J.; CASTILLA, ROCÍO

Capital Federal

Congreso; XII Jornadas Anuales de la Sociedad Argentina de Biología; 2010

Sociedad Argentina de Biología

Fosforilación de  ACiL-COA SiNTETASa 4 (Acsl4) en células esteroidogénicas Smith E, Podestá, EJ y Castilla R Departamento de  Bioquímica, Facultad de Medicina, IIMHNO Universidad de Buenos Aires. E-mail: emiliasmith7@hotmail.com   En células esteroidogénicas tanto los niveles de ácido araquidónico (AA)  como la esteroidogénesis son regulados por la actividad de Acsl4. Esta es una enzima que actúa como dímero, utiliza preferentemente AA como sustrato, es de alto recambio y se localiza en membranas asociadas a mitocondria (MAM). La síntesis de esteroides es modulada por diferentes hormonas o factores a través de fosforilación de proteínas mediadas por PKA y PKC. Ya que la secuencia aminoacídica de Acsl4 contiene sitios consensos para PKA y PKC, el objetivo de este trabajo fue determinar si Acsl4 es una fosfoproteína y si es sustrato de estas quinasas. Demostramos que la hormona adrenocorticotropina estimula la fosforilación de Acsl4 en células adrenales Y1 por electroforesis bidimensional,  incorporación de 32P[H3PO4] e inmunoprecipitación.  Demostramos además que Acsl4 es sustrato in vitro de PKA y PKC, siendo las fosforilaciones independientes una de otra. Además la actividad de la enzima aumentó cuando la enzima fue fosforilada por PKA mientras que la formación de dímero no se afectó. Ya que Acsl4 participa en la asociación MAM/mitocondria y que la fosforilación proteica es esencial para este evento es que consideramos que la fosforilación de Acsl4 juega un rol en este mecanismo.