Senescent secretome modulation by sirtuin activators in retinal pigment epithelium cells

MARAZITA MC; TATE PS; MARQUIONI-RAMELLA, MELISA; SUBURO AM

Buenos Aires

Congreso; XI Congreso AIVO (Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología) - III Joint Meeting AIVO-BRAVO.; 2016

AIVO - BRAVO.

El mecanismo de senescencia celular prematura gatilla la expresión de numerosos factores inflamatorios (senescence associated secretory phenotype, SASP) que podrían contribuir en la degeneración tisular característica de las enfermedades del envejecimiento. La degeneración macular asociada con la edad (DMAE) es una de las principales causas de discapacidad visual irreversible en mayores de 65 años. Hemos descripto que la activación de senescencia celular prematura, por daño oxidativo, desregula en células del epitelio pigmentario de la retina la expresión de factores centrales en la progresión de la AMD. Postulamos que las sirtuinas 1 y 3 (SIRT1, SIRT3), enzimas desacetilasas dependientes de NAD+ y con un rol clave en la respuesta al estrés y al envejecimiento, pueden modular el SASP. El objetivo del trabajo consistió en estudiar el efecto del ácido nicotínico (NA), un precursor de NAD+, y de ácido caféico (CAF) un polifenol con propiedades anti-inflamatorias, sobre las sirtuinas y el secretoma senescente, en células del epitelio pigmentario de la retina ARPE-19. Metodología: Células ARPE-19 fueron incubadas con H2O2 200 M por 90 minutos durante 3 días y luego mantenidas en medio fresco por 7 días. Los cultivos fueron expuestos a 1 mM NA o a 6 μg/ml CAF por 8 días. Los niveles de ARNm para IL-8, SIRT1, SIRT3 fueron estudiados por PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR). La inducción de senescencia fue estudiada mediante la detección de la actividad de b-galactosidasa (SA--gal+). Resultados: Tanto NA como CAF, aumentaron significativamente la expresión de SIRT3 y SIRT1 respectivamente, en comparación con cultivos senescentes no tratados. Ambos compuestos, disminuyeron significativamente los niveles de ARNm de IL-8, componente característico del SASP. No se observó disminución del número de células SA-β-gal+. Conclusions: NA y CAF , que modifican la expresión de sirtuinas, disminuyen un componente clave del SASP sin alterar el estado senescente. La modulación de SIRT1/3 podría ser un nuevo blanco para limitar los efectos del secretoma senescente en la retina.