CARACTERIZACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE LOS FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN INDUCIBLES POR HIPOXIA (HIFs) EN CÉLULAS DE SERTOLI (CS)

MERLO, JOAQUIN; REGUEIRA, MARIANA; RIERA, MARIA F.; PELLIZZARI, ELIANA H.; CIGORRAGA, SELVA B.; MERONI, SILVINA B.; GALARDO, MARIA N.

Mar del Plata

Congreso; LIX REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2014

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Los HIFs son factores de transcripción (FT) que regulan elmetabolismo glucolítico y crecimiento celular. Están formadospor la subunidad α (HIFα), cuya estabilidad depende de losniveles de O2, y la β de expresión constitutiva. Existen 3 isoformasα, que se asocian con HIFβ y constituyen los FT activosHIF1, 2 y 3. Previamente demostramos que la estabilización deHIF aumenta la producción de lactato y que FSH aumenta laexpresión de HIF1α en CS de rata de 20 días de edad (CS20).El objetivo de este trabajo fue analizar la expresión de las isoformasα en CS a través de la maduración y la posible participaciónde los HIFs en la regulación de la producción de lactatopor FSH en CS20. En cultivos de CS de ratas de 8 (CS8), 20 y31 (CS31) días de edad se determinaron los niveles de ARNmde HIF1α, 2α y 3α. Se observó mayor expresión de HIF1α(CS8: 1,89±0,54a; CS20: 0,73±0,19b; CS31: 0,76±0,1b) y deHIF3α (CS8: 4,16±0,14a; CS20: 1,07±0,30b; CS31: 0,28±0,05c)en CS8. La expresión de HIF2α fue mayor en CS20 (CS8:0,34±0,4a; CS20: 1,08±0,13b; CS31: 0,29±0,11a). Resultadosexpresados como relación de la cantidad de ARNm HIFα/HPRT(X±DS; n=3), distintas letras indican diferencias significativas.Por otro lado, utilizando en CS20 un agente que promueve ladegradación de HIFα (LW6, 10µM), se demostró la participaciónde HIF en la regulación por FSH de diversos mecanismosinvolucrados en la producción de lactato. En particular seobservó que LW6 inhibe el estímulo de FSH (100ng/ml) sobre:la producción de lactato (B: 9,98±1,13a; FSH: 15,15±0,31b;FSH+LW6: 9,94±1,06aµg/µgADN), la entrada de glucosa a lacélula (B: 267±12a; FSH: 352±7b; FSH+LW6: 226±35adpm/µgADN) y la expresión de Piruvato Kinasa M2 (FSH: 1,5±0,2a;FSH+LW6: 1,0±0,1bveces con respecto a B). Los resultadosdemuestran una expresión variable de las isoformas HIFα conla maduración. Adicionalmente sugieren que dicho FT participaen la regulación por FSH de la producción de lactato, nutrienteesencial para las células germinales. PICT2012-0666