EFECTO DE LA L-CARNITINA SOBRE LOS PARÁMETROS DE FECUNDACIÓN IN VITRO EN PORCINOS

CRUZANS, PR.; LORENZO, MS.; TEPLITZ, G.; LOMBARDO, DM.

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Jornada; VII Jornadas de Jóvenes Investigadores 2017; 2017

Secretaría de Ciencia y Técnica FVET-UBA

La L-carnitina (LC) desempeña un papel importante en el catabolismo de los lípidos y como antioxidante. Anteriormente concluimos que bajas concentraciones de LC en el medio de maduración in vitro disminuye el nivel intracelular de especies reactivas de oxígeno y la cantidad intracelular de lípidos de los ovocitos porcinos respecto al control sin afectar el porcentaje de maduración nuclear. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto del agregado de distintas concentraciones de LC al medio de maduración in vitro sobre los parámetros de fecundación in vitro en porcinos. Los complejos cumulus-ovocito (COC) se obtuvieron por aspiración folicular de ovarios de cerdas de faena. Los COC se maduraron in vitro sin LC (control) o con distintas concentraciones de LC (0,6 y 1,25 mg/mL) en el medio de maduración (TCM-199 suplementado) por 44 h a 39°C y 5% de CO2. Luego, los ovocitos se denudaron y se coincubaron con semen fresco (1x106 espermatozoides/mL) por 6 h. Los espermatozoides se removieron por vortex y los presuntos cigotos se incubaron durante 12 h en medio SOF a 39°C, atmósfera saturada de humedad y 5% de CO2. Para determinar la maduración citoplasmática, se centrifugaron 30 min a 2000 rpm, se fijaron y se tiñeron con Hoechst 33342, cuantificando los porcentajes de penetración espermática, de formación de pronúcleo masculino (PN), de penetración monospérmica y de eficiencia (control: n = 165; LC 0,6: n = 134; LC 1,25: n = 128). Se consideraron penetrados cuando tenían al menos un espermatozoide con cabeza descondensada o dos PN y se consideraron monospérmicos cuando tenían un solo espermatozoide con cabeza descondensada o dos PN. Los presuntos cigotos se observaron con microscopio de fluorescencia Leica DM4000B. Se realizó una prueba de homogeneidad (de chi cuadrado) y se consideró una diferencia estadísticamente significativa si p ≤0,05. No se detectaron diferencias significativas en los porcentajes de penetración espermática (control = 55,76%; LC 0,6 = 48,51%; LC 1,25 = 46,09%), de formación de PN (control = 66,3%; LC 0,6 = 53,85%; LC 1,25 = 54,24%), de penetración monospérmica (control = 34,78%; LC 0,6 = 40%; LC 1,25 = 33,9%) y de eficiencia (control = 19,39%; LC 0,6 = 19,4%; LC 1,25 = 15,63%) entre los distintos grupos. La LC no posee ningún efecto sobre los parámetros de fecundación in vitro comparado con el control. Posteriormente se evaluará el efecto de la LC sobre el desarrollo embrionario y sobre la tolerancia a la vitrificación de los ovocitos maduros.