ESTUDIO DE LA NUCLEÓSIDO DIFOSFATO QUINASA 1 DE Trypanosoma cruzi Y SU PARTICIPACIÓN EN MECANISMOS DE REPARACIÓN DEL ADN

SAYE M; CHANTAL REIGADA; VALERA VERA EA; DIGIROLAMO F; CLAUDIO A PEREIRA; MIRANDA MR

Congreso; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2016

Las nucleósido difosfato quinasas (NDPK) son enzimas que intervienen en la homeostasis intracelular de nucleótidos di- y trifosfato. Son enzimas multifuncionales puesto que participan en numerosos procesos celulares como apoptosis, transducción de señales y reparación de ADN, entre otros. La NDPK1 de Trypanosoma cruzi (TcNDPK1), es la única isoforma canónica presente en el parásito, la cual es secretada, está involucrada en la resistencia a drogas tripanocidas y tiene la capacidad de unirse y degradar ácidos nucleicos in vitro. En el presente trabajo, evaluamos la participación de la NDPK en mecanismos de reparación de ADN mediante su expresión en sistemas de heterólogos. En primera instancia, determinamos que la frecuencia de mutación espontánea de bacterias que expresan la TcNDPK1, obtenida mediante la selección de colonias resistentes a rifampicina, se redujo 5 veces respecto del control, siendo una primera evidencia de su posible función en la reparación del ADN. Para seguir evaluando dicha actividad, expresamos la enzima en un modelo de levaduras que carece del gen endógeno de la NDPK. Estas levaduras presentaron un crecimiento más eficiente que las levaduras control. Asimismo el tratamiento con agentes genotóxicos como el peróxido de hidrógeno demostró que sobreviven a altas concentraciones del mismo, siendo la IC50 significativamente superior respecto del control, 21.2 mM y 6.3 mM respectivamente. Por último, se evaluó el efecto de la radiación UV y se encontró que estas levaduras presentan mayor supervivencia al daño generado. Los resultados mostrados sugieren que la TcNDPK1 podría estar involucrada en la maquinaria de reparación de ADN, un nuevo rol que se incorpora a las múltiples y diversas funciones que desempeña.