EL VALPROATO DISMINUYE LA PRESION ARTERIAL AFECTANDO LA EXPRESION DE TRH DIENCEFALICA EN LA RATA SHR: ROL DEL ESTADO DE METILACION DEL DNA

MARIANO L. SCHUMAN; MARIELA M. GIRONACCI; MARÍA S. LANDA; MAIA AISICOVICH; CARLOS J. PIROLA; LUDMILA S PERES DIAZ; SILVIA I. GARCÍA

Buenos Aires

Jornada; XIV JORNADAS CIENTÍFICAS DEL INSTITUTO DE INVESTIGACIONES MÉDICAS ALFREDO LANARI; 2016

INSTITUTO DE INVESTIGACIONES MÉDICAS ALFREDO LANARI

Nuestro grupo de trabajo ha demostrado mediante numerosos experimentos que la TRH diencefálica participa en la regulación de la presión arterial en diversos modelos animales. Es sabido que en la regulación de la expresión de genes participan diversos factores, como el estado de condensación cromatínica. Los cambios en la estructura cromatínica se llevan a cabo mediante diversos mecanismos como la metilación de DNA y la acetilación de histonas, entre otros. Estas modificaciones generan una expresión diferencial dependiendo de las condiciones del entorno, resultando en activación o silenciamiento.El valproato (VPA), utilizado en el tratamiento de desórdenes bipolares y epilepsia, es capaz de inhibir a HDACs (histonas deacetilasas) afectando el estado de acetilación y expresión de genes.Teniendo en cuenta que la SHR presenta una hiperactivación del sistema TRHd y participa en el mantenimiento y desarrollo de la hipertensión, hipotetizamos que el tratamiento con VPA afectaría los niveles de presión arterial sistólica (PAS) mediante la regulación de la expresión de TRH a partir de cambios en el estado de metilación de su promotor.Machos SHR y WKY (n=6/grupo) fueron asignados a tratamiento control o con valproato (0 o 700mg/kg/día respectivamente) agregado a la dieta estándar. El tratamiento comenzó en la semana 7 de vida (estado pre-hipertenso) y se extendió durante 10 semanas. Adicionalmente se repitió el protocolo en otro grupo de machos y hembras SHR y WKY. Luego de 10 semanas, el tratamiento fue interrumpido por 8 semanas y se pusieron los animales en apareo. Se estudiaron sus crías, destacando que ellas no recibieron ningún tratamiento pero nacieron de padres tratados. Se les registró PAS previo al sacrificio a los 4 meses de vida.La PAS se evaluó mediante método pletismográfico. Luego del sacrificio se extrajo el diencéfalo para la extracción de RNA y cuantificación de pre-proTRH mRNA mediante PCR en tiempo real y se extrajo DNA para la evaluación del estado de metilación mediante PCR metilación específica (MS-PCR).Se observó en ratas machos adultas, que la PAS fue menor en las ratas SHR+VPA comparada con las SHR controles (201±3.28 vs 220±3.55 mmHg respectivamente, p< 0.05), sin presentar cambios entre los grupos de ratas WKY. De acuerdo a nuestra hipótesis, observamos una reducción en la expresión de mRNA-TRH en el grupo SHR+VPA comparado con el grupo SHR control (0.023±0.008 vs 0.060±0.007 a.u., p