Diseño de estrategias para el estudio funcional de un nuevo transportador de aminoácidos en Echinococcus granulosus.

CAMICIA FEDERICO; CANEPA GASPAR E; PRADA LAURA; PEREIRA CLAUDIO A; ROSENZVIT MARA

Rosario

Congreso; VIII Congreso Argentino de Protozoologia y Enfermedades Parasitarias; 2008

Sociedad Argentina de Protozoologia

La hidatidosis es una zoonosis causada por el estadio larval del parásito cestode Echinococcus granulosus (Eg), de distribución cosmopolita. Utilizando el método de captura de secuencia señal (SST) se logró aislar, a partir de protoescólices de Eg, ADNs copia codificantes para probables transportadores de aminoácidos. Uno de ellos, egat1, ha mostrado similitud aminoacídica y nucleotídica con proteínas pertenecientes a la familia de simportadores de dicarboxilato/aminoácido y catión (Na+ ó H+) (DAACS). Entre los miembros de dicha familia, se encuentran los transportadores de aminoácidos neutros (tipo ASCT) y excitatorios (tipo EAAT). La presencia de EgAT1 en zona tegumentaria y subtegumentaria mediante hibridación in situ e inmunolocalización respectivamente y la ausencia de marca en sistema nervioso sugiere que EgAT1 podría tener una función compatible con transportadores neutros. Con el objetivo de confirmar la función de transporte de aminoácidos predicha mediante análisis bioinformático e inmunolocalización, se introdujo la secuencia codificante de egat1 en un vector de expresión de levadura. Cepas de Saccharomyces cerevisiae mutantes para el sistema general de transporte de aminoácidos están siendo transformadas con las construcciones obtenidas para ser utilizadas en ensayos de incorporación de aminoácidos neutros y excitatorios radiomarcados. Como estrategia alternativa, se ha introducido la secuencia codificante de egat1 en un vector de expresión para la transfección de células COS7. Los estudios funcionales permitirán determinar si la función predicha in silico es correcta y posibilitarán en dicho caso determinar la especificidad de transporte.