INVESTIGADORES
MON Maria Laura
congresos y reuniones científicas
Título:
Desarrollo de inmunocromatografia de flujo lateral para el diagnóstico de Tuberculosis y Paratuberculosis bovina.
Autor/es:
ALONSO MARIA NATALIA; MARIA LAURA MON; ROBERTO DAMIÁN MOYANO; CUERDA MARIA XIMENA; MARIA DE LA PAZ SANTANGELO; ROMANO, MI
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; REUNIÓN DE LA SOCIEDAD LATINOAMERICANA DE TUBERCULOSIS Y OTRAS MICOBACTERIOSIS (SLAMTB); 2016
Institución organizadora:
Sociedad latinoamericana de tuberculosis y otras micobacteriosis
Resumen:
La Tuberculosis bovina (TBB), producida por Mycobacteria bovis (MB) y la Paratuberculosis (PTB), producida por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP), afectan principalmente a rumiantes, son de importancia en la producción agropecuaria de Argentina y por su naturaleza zoonótica. Las micobacterias del complejo tuberculosis, entre cuyos miembros se encuentran M. tuberculosis (MT) y M. bovis (MB), y las micobacterias del complejo avium (MAC), entre cuyos miembros se encuentra M. avium subsp avium (MAV) y M. avium subsp. paratuberculosis (MAP) están altamente relacionadas a nivel genético y antigénico, por lo cual comparten mecanismos y factores de virulencia. Por otro lado, en la actualidad las técnicas de diagnóstico de Tuberculosis y Paratuberculosis bovina son poco específicas sin diferenciar animales infectados de vacunados. Más aun, si bien hay vacunas comerciales disponibles para PTB, estas interfieren con el diagnóstico de TBB. Por tal motivo el objetivo del presente trabajo es desarrollar una herramienta de diagnóstico utilizando una inmunocromatografia de flujo lateral (ICFL) con antígenos específicos de MB y de MAP que permitan diferenciar ambas enfermedades. Para ello se evaluaron diferentes concentraciones y condiciones de los antígenos ESAT‐6, CFP‐10, MPB83 de MB y de la mezcla PPA3 de MAP conjugados a oro coloidal en ICFL, exponiendolas a sueros bovinos positivos y negativos a ambas enfermedades. La sensibilidad y especificidad de la técnica desarrollada fue comparada y confirmada por ELISA y dot blot realizados en las condiciones de rutina en el laboratorio. En el caso de MB los antígenos ESAT‐6 y CFP‐10 dieron señales inespecífica detectándose en sueros negativos en todas las concentraciones evaluadas (5, 2 y 1 ug/ul). En cambio, el antígeno MPB83 resulto ser más sensible y específico en la concentración de 1ug/ul, detectando únicamente sueros positivos para TBB. Por otro lado, la mezcla PPA3 detecto específicamente sueros positivos de MAP en la concentración de 1ug/ul. Cabe destacar que también se evaluó la detección cruzada de ambas enfermedades con los antígenos MPB83 y PPA3 sin observarse reacciones cruzadas. Por otro lado, la correcta conjugación a oro coloidal fue confirmada en todos los casos mediante dot blot. Finalmente, los resultados obtenidos por la inmunocromatografìa realizada fueron confirmados por ELISA satisfactoriamente En este trabajo hemos desarrollado una técnica rápida de diagnóstico diferencial de TBB y PTB, utilizando antígenos específicos de cada enfermedad.