RECEPTORES P2 MODULAN LA DIFERENCIACIÓN CELULAR Y LA EXPRESIÓN GÉNICA DE PROTEÍNAS MORFOGENÉTICAS ÓSEAS (BMP) EN CULTIVOS PRIMARIOS DE OSTEOBLASTOS DE CALVARIA DE RATA NEONATA

AYALA PEÑA V.B.; SANTILLAN G. E.

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina Investigación Clínica (SAIC); 2012

Los osteoblastos son células que surgen por diferenciación de las células osteoprogenitoras, bajo la influencia de diversas proteínas, dentro de ellas las BMPs. Se sabe que distintos tipos de estrés como fuerzas mecánicas, ultrasonido, etc. estimulan la expresión de algunas BMPs y la formación de hueso. A su vez se ha reportado que estos estímulos aumentan la acumulación de ATP y UTP en el espacio extracelular. Estos o sus metabolitos pueden actuar sobre receptores P2 (P2X, ionotrópicos y P2Y, metabotrópicos) de la membrana plasmática para inducir diversas respuestas celulares. En este trabajo estudiamos el efecto de ATP, ATPγs, UTP, ADPbetas, y UDP (10 y 100 uM) sobre la diferenciación de osteoblastos, evaluando la formación de nódulos de mineralización por tinción con rojo alizarina y los niveles de expresión génica de BMP-4, BMP-5, y BSP (sialoproteína ósea), por técnicas de QRT-PCR, en función del tiempo de tratamiento en osteoblástos de calvaria de rata (OBC) en medio osteogénico. OBC tratados con ATP o UTP 100 uM en medio osteogénico comenzaron a presentar cambios morfológicos a partir del día 7 de tratamiento, dichos cambios se correlacionaron con un aumento significativo, respecto a los controles, en la expresión génica de BMP-4, BMP-5, y BSP. Además, bajo esas mismas condiciones, se observó alrededor del día 22 un incremento en la deposición de calcio con respecto a los controles. Sin embargo a concentraciones 10 uM ATP o UTP incrementan, en forma significativa, los niveles de expresión génica de BMP-4 y BSP a tiempos tempranos (2-3 días de tratamiento) respecto a los controles, pero BMP-5, sólo resultó ser responsiva a UTP 10 uM. Estos resultados sugieren un rol importante para los receptores P2Y2 y/o P2Y4 en la maduración de células óseas y demostramos, por primera vez, que los nucleótidos extracelulares modulan la expresión de genes responsables de la maduración y función del osteoblasto como BMP-4, BMP-5, y BSP.