MICROARNS INVOLUCRADOS EN LA DIFERENCIA- CIÓN DE CÉLULAS MADRE PLURIPOTENTES HUMANAS A MESODERMO TEMPRANO Y CARDIOMIOCITOS

XIMENA GARATE; LEONARDO ROMORINI; GABRIEL NEIMAN; CAROLINA BLUGUERMANN; MARÍA ELIDA SCASSA; GUSTAVO SEVLEVER; SANTIAGO G. MIRIUKA

Mar del Plata

Congreso; LVIII Cogreso de SAIC; 2013

SAIC

Las células madre embrionarias humanas (CME) y pluripoten- tes inducidas (CMPI) poseen dos características fundamentales: auto-renovación y pluripotencia. Los microARNs son pequeños ARN esenciales para la regulación de la expresión génica en la pluripotencia (mir302 y mir145) y en la cardiomiogénesis (mir1, mir133, mir206 y mir208). Sin embargo, no se conoce la dinámica de expresión de los mismos a lo largo de la diferenciación de CME y CMPI hacia cardiomiocitos. Nuestro objetivo fue determinar el perfil de expresión de los microARNs involucrados en la regulación de dicho proceso. Células H9 (CME) y FL1 (CMPI) se diferenciaron mediante un protocolo que comprende la formación de cuerpos embrioides y la estimulación con BMP4, Activina A e IWR1. En el día 14 de la diferenciación observamos en las células H9 cambios significativos en los niveles de expresión (RT-qPCR) de mir302 y mir145 (0,27±0,05; 115,48±24,83 veces vs día 0, respectivamen- te). A su vez, los niveles de expresión de mir1, mir133, mir206 y mir208 aumentan a lo largo de la diferenciación (373,29±100,88; 373,82±80,88; 16,85±3,41y 615,77±134,86 vs día 0, respectiva- mente). Resultados similares se obtuvieron con las células FL1. Una familia de procesos celulares relevantes para el desarrollo embrionario es la transición epitelio-mesenquimal (EMT), siendo la formación del mesodermo un ejemplo de la misma. Por ello, analizamos qué microARNs estarían involucrados en la EMT que ocurre durante la diferenciación de CME a mesodermo temprano. De los microRNAs analizados en una población de progenitores mesodérmicos (día 3.5 de la diferenciación) observamos un cam- bio significativo en los niveles de expresión del mir205 (0,14±0,04 veces vs día 0). Podemos concluir que durante la diferenciación de CME y CMPI a cardiomiocitos la expresión de ciertos microARNs asociados a cardiomiogénesis aumenta marcadamente. Además, identificamos al mir205 como un microARN que podría modular la transición EMT de CME a mesodermo.