Estudio del control de la expresión de genes relacionados con la defensa ante el estrés oxidativo y con el remodelado de la cromatina por parte de los factores de transcripción fundamentales de células madre pluripotentes.

CLAUDIA SOLARI; ARIEL WAISMAN; SOLEDAD COSENTINO; CARLOS LUZZANI; NOELIA LOSINO; VAZQUEZ ECHEGARAY C; LEONARDO ROMORINI; MARÍA QUESTA; SANTIAGO G. MIRIUKA; LINO BARAÑAO; ALEJANDRA S. GUBERMAN

Mar del Plata

Congreso; LVIII Cogreso de SAIC; 2013

SAIC

Las células madre (CM) embrionarias (CME) y las CM pluripo- tentes (CMP) inducidas (CMPI) poseen dos propiedades funda- mentales: la autorrenovación y la pluripotencia. Estas propiedades son mantenidas por una serie de factores de transcripción (FT) específicos, siendo los más importantes Oct4, Sox2 y Nanog. Nuestra hipótesis es que estos FT regulan la expresión de genes involucrados en diversos mecanismos celulares, centrándonos en el estudio de la regulación de la estructura de la cromatina, ya que durante la diferenciación ocurren cambios en su organización; y en la defensa frente al estrés oxidativo, dado que la estabilidad genómica es esencial en CMP para evitar la propagación de daños genéticos. En este trabajo estudiamos los genes Myst2, Myst3, Myst4, Prmt8, Atf7ip, Taf15, Sod1, Sod2, Txn1, Txn2, Gpx1, en- tre otros. En primer lugar, realizamos un análisis in silico de las regiones promotoras en busca de secuencias consenso de unión de dichos FT. Encontramos que estos genes poseen hasta 13 sitios de unión para cada FT, y sitios para por lo menos dos de estos FT en una región analizada de 5 kpb. Luego estudiamos el perfil de expresión mediante RT-qPCR en CME y en CMPI, tanto en estado indiferenciado como durante la diferenciación, utilizando distintos protocolos de diferenciación. Algunos genes como Prmt8, Sod1 y Sod2, se reprimieron notoriamente durante la diferenciación. En conjunto, estos resultados sugieren que los mencionados genes podrían ser regulados por dichos FT. Actual- mente, nos encontramos estudiando esta regulación, mediante dos estrategias. Analizamos los niveles endógenos de estos genes en sistemas heterólogos transfectados con los FT, y diseñamos construcciones reporteras para ensayos de luciferasa abarcando distintas regiones de los promotores. El estudio de esta regulación contribuirá a la comprensión de los mecanismos que poseen las CM para mantener sus propiedades fundamentales y la integridad de su genoma