Nanoscopía de fluorescencia por localización estocástica y medición de flujos en la escala nanométrica.

LUCIANO A. MASULLO; FEDERICO M. BARABAS; FERNANDO D. STEFANI

Buenos Aires

Taller; XII Taller de Óptica y Fotónica; 2016

Título del trabajo: Nanoscopía de fluorescencia por localización estocástica y medición de flujos en la escala nanométrica.Autores: F. Barabas (1,2), L. Masullo (2), F. Stefani (1,2)mail de contacto: federico.barabas@cibion.conicet.gov.arAfiliación: 1 ? CIBION, CONICET, Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Argentina2 ? Departamento de Física, FCEyN, UBA, Ciudad Autónoma de Buenos Aires, ArgentinaResumen: En la última década se han desarrollado las llamadas nanoscopías de fluorescencia o microscopías de superresolución[1-2], que permiten discernir detalles de dimensiones menores al límite de ~200 nm dado por la difracción de la luz y manteniendo las importantes ventajas de la microscopía de fluorescencia tradicional. Las mediciones de nanoscopía por localización estocástica consisten en la adquisición secuencial de imágenes donde en cada una, unos pocos fluoróforos son visualizados individualmente, de modo que su posición puede determinarse con precisión ya no limitada por la difracción. El proceso se repite de manera que en cada imagen se visualizan distintas moléculas de la muestra. La localización de cada fluoróforo de la secuencia permite reconstruir una imagen con una resolución que depende del número de fotones emitidos y que ronda los 20-40 nm. Se construyó un nanoscopio de fluorescencia con localización 3D y con posibilidad de obtener imágenes a dos colores de emisión. Aquí se presentan detalles de esa construcción, así como algunas de las imágenes de muestras biológicas y plasmónicas. Además, se reporta el estado de avance en experimentos de medición de flujos en la escala nanométrica, con el mismo dispositivo experimental.Referencias:1. Rust M. et al., ?Precisely and accurately localizing single emitters in fluorescence microscopy?, Nature Methods, 3 (10): 793-796, 2006.2. Bates M. et al., ?Multicolor super-resolution imaging with photo-switchable fluorescent probes?, Science, 317 (5845): 1749-1753, 2007.