ROL DEL ANIÓN CLORURO COMO SEGUNDO MENSAJERO EN LA MODULACIÓN DE LA EXPRESIÓN DE GENES ESPECÍFICOS.

A. G. VALDIVIESO; M. CLAUZURE; M. MASSIP COPIZ; CARLA CANCIO; CONSUELO MORI; CRISTIAN JORGE ALEJANDRO ASENSIO; T. A. SANTA COLOMA

Mar del Plata

Congreso; LX REUNIÓN DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLÍNICA (SAIC); 2015

SAIC

La Fibrosis Quística (FQ) es causada por mutaciones en elgen CFTR que codifica un canal de transporte de iones cloruro(Cl-) activado por AMPc. Numerosos genes-CFTR dependienteshan sido identificados, aunque se desconoce el mecanismo deregulación involucrado. Debido a que el CFTR es un canal de Cl-, laalteración de su actividad conduciría a cambios en la concentraciónintracelular de Cl- ([Cl-]i). Nuestra hipótesis es que la [Cl-]i podríaformar parte del mecanismo de señalización en la modulación degenes específicos. Mediante la técnica de ?Differential display? seanalizó el perfil de expresión en células IB3-1, línea celular de FQ,incubadas con una curva de concentración de Cl- en presenciade dos ionóforos (tributyltin y nigericina), lo que permite equilibrarrápidamente la [Cl-]i con la concentración de Cl- extracelular, independientementede la función del CFTR y de otros canales de Cl-.Mediante esta estrategia, observamos varios genes expresadosdiferencialmente. Dos de estos genes expresados diferencialmentepor la [Cl-]i fueron aislados, clonados y secuenciados. La modulaciónde la expresión de estos genes por el anión Cl- fue validada porRT-PCR cuantitativa en tiempo real. El primero de estos genes fueidentificado como el gen RPS27 que codifica la proteína ribosomalS27. El mismo mostró una regulación negativa por el aumento dela [Cl-]i salvo a concentraciones no fisiológicas, por encima de 100mM, para las cuales mostró una modulación positiva (respuestabifásica para la [Cl-]i). El segundo gen identificado, moduladopositivamente por el aumento de la [Cl-]i, correspondió al genGLRX5, que codifica la proteína glutarredoxina-5, de localizaciónmitocondrial. Estos resultados sugieren que el anión Cl- actuaríacomo segundo mensajero, modulando la expresión de genesespecíficos en respuesta a cambios en la [Cl-]i. Agradecimientos:CONICET, PIP2012-2014-0685 y PICT2012-1278 de la ANPCYT.