CIVETAN   23983
CENTRO DE INVESTIGACION VETERINARIA DE TANDIL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
IDENTIFICACIÓN DE UNA PROBABLE TOXINA CITOLETAL EN FILTRADOS LIBRES DE CELULAS DE CAMPYLOBACTER FETUS
Autor/es:
ACEVEDO M.E.; SOLANA H.; CHIAPARRONE M.L.; CATENA M.
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Jornada; V Jornadas de Jóvenes Investigadores "Ciencia y Sociedad"; 2015
Institución organizadora:
FCV-UBA
Resumen:
La
campybacteriosis digestiva es producida por Campylobacter
jejuni y coli entre otros. Dichas
subespecies expresan una toxina de distención citoletal (cytolethal distending
toxin (CDT). Dicha toxina, la CLDT de 68 Kda,
ha sido caracterizada genotípicamente y evaluado su efecto en varias líneas
celulares. Por otro lado, la campylobacteriosis genital bovina es causada por C. fetus spp fetus y veneralis. En estas
subespecies existen estudios preliminares de la patogenia de la enfermedad pero
poco se conoce sobre la probable presencia de una toxina citoletal. Estudios
previos de nuestro grupo han demostrado que el filtrado libre de células (FLC)
de C. fetus posee efecto citoletal en
células HeLa y CHO desconociéndose hasta el presente la probable presencia de
una CDT específica. El objetivo del presente trabajo fue la identificación de las
proteínas presentes en el filtrado libre de células de Campylobacter fetus.
Se
evaluaron 10 (diez) FLC de diferentes cepas de C. fetus. Se cuantificaron sus proteínas totales por el método deBradford utilizando como control negativo el filtrado del Caldo Brucella
(CB) libre de campylobacter. Posteriormente se analizó el contenido proteico de
los FLC por medio de electroforesis en SDS-PAGE al 10% utilizando el CB como
control negativo.
Los
10 FLC analizados presentaron una gran variabilidad en la concentración de sus proteínas
totales (de 0,0349 a 3,731 mg/mL). En el
análisis por SDS-PAGE en 6 (seis) FLC se observó una única proteína con un peso
molecular de aproximadamente 70 Kda, la cual no se visualiza en el CB control. Los
4 (cuatro) FLC restantes no presentaron ninguna banda visible.
La
variabilidad en la concentración de proteínas detectadas en los diferentes FLC podría
deberse al comportamiento individual de cada cepa, siendo esto motivo de
estudio en futuros trabajos. La única
proteína de 70Kda detectada en los FLC de C.
fetus tiene amplias chances de estar asociada al fenómeno de citoletalidad descripto
en células HeLa y CHO estando previsto su purificación y análisis. La electroforesis en SDS-PAGE posee un
límite mínimo de detección cercano a los 8 µg por lo cual se deberán hacer
estudios posteriores para evaluar aquellos FLC que dieron negativos para
descartar o confirmar la presencia de dicha proteína de 70kd en una
concentración por debajo del poder resolutivo del método electroforético
utilizado.