MECANISMO DE REGULACIÓN DEL PH EXTRACELULAR POR EL CANAL DE CLORURO CFTR.

CANCIO, C.E.; MORI, C.; MASSIP COPIZ, M.M.; CLAUZURE, M.; VALDIVIESO, A. G.; SANTA COLOMA, T.A .

Mar del Plata

Congreso; LX REUNIÓN DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLÍNICA (SAIC); 2015

SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLÍNICA (SAIC)

La Fibrosis Quística (FQ) es causada por mutaciones en el gen CFTR,que codifica un canal de Cl- y HCO3- activado por AMPc. Se hapropuesto que la falla de la función del CFTR como transportador de HCO3- induce una disminución del pH extracelular (pHe).Anteriormente, reportamos que la reducción de la actividad delComplejo I mitocondrial (CIm) en FQ está mediada por un efectoautocrino de interleuquina-1 beta (IL-1β). Esta falla en el CIm podríaafectar la producción de lactato por efecto Warburg. Proponemoscomo hipótesis que el pHe estaría disminuido por una combinaciónentre el menor transporte de HCO3- y el aumento en la producción deácido láctico. Nuestro objetivo fue demostrar esta hipótesis y estudiarlos mecanismos de regulación del pHe mediados por CFTR. Comomodelo se utilizaron células Caco-2 (CFTR salvaje) transfectadas conun plásmido de ARN de interferencia contra el CFTR (shRNAi, CacopRS26)y con un plásmido control (Caco-pRS30003). Las célulasCaco-pRS26 mostraron una reducción significativa del pHe conrespecto a las células controles. El tratamiento de las células CacopRS30003(CFTR salvaje) con IL-1β exógena produjo una reducciónsignificativa del pHe. El bloqueo de la señalización de IL-1β con elantagonista ILRN1 en células Caco-pRS26 rescató parcialmente elpHe, lo que sugiere un efecto autocrino de dicha citoquina. Luego seestudiaron diferentes vías de señalización de IL-1β. La inhibición de c-Src (PP2) y de JNK (SP600125), aumentó significativamente el pHeen ambas líneas celulares. El tratamiento con oxamato, un inhibidorde la lactato deshidrogenasa, rescató el pHe en las células CacopRS26comparadas con las células controles. Estos datos sugierenque la producción de ácido láctico, incrementada por la disminuciónde la actividad del CFTR, cumple un rol fundamental en la regulacióndel pHe. Agradecimientos: CONICET, PIP2012-2014-0685 yPICT2012-1278 de la ANPCYT. Beca Agencia (CEC), beca UCA (MC)y becas CONICET (CM, MMMC, MC).