INVESTIGADORES
MORE Gaston Andres
congresos y reuniones científicas
Título:
Identificación de antígenos inmunodominantes para la confirmación del diagnóstico de toxoplasmosis en caprinos
Autor/es:
GOS, M. L.; CAMPERO, L.M.; STEFFEN, K.D.; BERNSTEIN, M.; PARDINI, L.; UNZAGA, J.M.; MORÉ, G.; VENTURINI, M.C.
Reunión:
Encuentro; XXVII reunión anual de la Sociedad Argentina de Protozoología (SAP 2015); 2015
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozoología
Resumen:
La toxoplasmosis es una zoonosis producida por Toxoplasma gondii que causa problemas reproductivos en caprinos. El diagnóstico serológico en nuestro país se realiza principalmente por Inmunofluorescencia Indirecta, pero serían necesarias técnicas más específicas para la confirmación de la infección. El objetivo de este estudio fue analizar sueros caprinos por la técnica de Inmunoblot (IB) para identificar los antígenos inmunodominantes (IDAs) específicos. Se analizaron 100 sueros caprinos, usando como antígeno el sonicado de taquizoítos de la cepa RH de T. gondii en condiciones no reducidas. Las proteínas se separaron por electroforesis en geles de poliacrilamida (SDS-PAGE) y se transfirieron a membranas de fluoruro de polivinilideno (PVDF). Éstas últimas se cortaron y se incubaron con los sueros problema, poniendo en evidencia la unión antígeno- anticuerpo con un conjugado anti-cabra unido a peroxidasa, utilizando H2O2 como sustrato y en presencia de 4-cloronaftol como cromógeno. Se identificaron las proteínas de 34, 32, 30, 28 y 19 kDa como IDAs considerándose una muestra positiva cuando reaccionó por lo menos a dos de ellas. Del total, 21 muestras fueron positivas, en las que la detección de las bandas de 34 y 30 kDa fue constante, mientras que las de 32, 28 y 19 kDa fue variable. De las muestras negativas (n= 79), 21 reaccionaron con la proteína de 34 kDa. Las fracciones de 30 y 34 kDa son los antígenos principales para el diagnóstico de toxoplasmosis en caprinos. La banda de 30 kDa es la más específica, sin ser detectada en las muestras identificadas como negativas. Sin embargo, la reacción positiva de la banda de 34 kDa debe considerarse si se detecta en conjunto con alguno de los demás IDAs (32, 30, 28 y 19 kDa). La prueba de IB puede ser utilizada en combinación con otras técnicas para incrementar la especificidad en el diagnóstico de toxoplasmosis en caprinos.