La administracion intracerebroventricular del receptor soluble de TNF alfa protege el efecto local de Stx2 en estriado de rata

J BOCCOLI, CF LOIDL, V PISTONE CREYDT, C IBARRA, J GOLDSTEIN

Mar del Plata

Congreso; LII REUNION CIENTIFICA ANUAL, Sociedad Argentina de Investigacion Clinica (SAIC); 2007

SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLÍNICA

La toxina Shiga (Stx) proveniente de Escherichia coli enterohemorragica (STEC) causa colitis hemorragica, sindrome ure¦mico hemolitico (SUH) y encefalopatia aguda, uno de los mayores factores de riesgo de mortalidad infantil. Previamente publicamos que la directa administracion intracerebroventricular (icv) de Stx2 en cerebros de rata causa lesiones en diferentes tipos celulares. El presente trabajo demuestra la participacion de TNF-alfa en el mismo modelo descripto. Para ello comparamos los efectos de Stx2 en presencia y en ausencia de un receptor soluble de TNF-alfa (RsTNF-Á). Luego de 8 dias de tratamiento las ratas fueron anestesiadas, perfundidas y sus cerebros extraidos para estudios morfologicos. Se observa una lesion en el estriado con disminucion de sustancia blanca causada por la Stx2 analizada por tincion de Nissl, que altera los niveles de expresion de la proteina gliofibrilar acida en dosis dependiente visualizada por inmunofluorescencia. La lesion fue atenuada por la administracion combinada de la Stx2 y el RsTNF-¦Á. Finalmente se observo por microscopia inmunoelectronica usando particulas de oro coloidal acoplado a un anticuerpo secundario que reconoce a anti-Stx2 que el tratamiento combinado de Stx2 con el RsTNF-¦Á redujo significativamente (p<0,01) la distribucion de la toxina en nucleos y zonas perinucleares con RER de neuronas estriatales, y axones mielinicos. No se detectaron particulas de oro en el control de isotipo, negativo o tratado con un vehiculo. Por lo tanto la disminucion en el numero de particulas correspondientes a Stx2 encontradas en neuronas y fibras del estriado tratadas con el RsTNF-¦Á coincidio con una atenuacion de la lesion desarrollada por la toxina. Estos resultados preliminares sugieren que la induccion local de TNF-¦Á por Stx2 potencia la lesion estriatal.