La toxina epsilon de Clostridium perfringens incrementa la permeabilidad del intestino delgado de roedores

CARLA TIRONI FARINATI1, WINSTON E. MORRIS2, FABIAN LOIDL1, JORGE GOLDSTEIN1, MARIANA DUNLEAVY2, FRANCISCO UZAL3, MARIANO E. FERNANDEZ MIYAKAWA2,3.

Mar del Plata

Congreso; LII REUNION CIENTIFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2007

SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACION CLINICA

La toxina épsilon (ETX) de Clostridium perfringens es una potente neurotoxina que produce edema por destrucción de las células endoteliales y también cambios fisiológicos y morfológicos en el tracto intestinal. Esta toxina es la causa de importantes enfermedades en animales y es considerada una seria amenaza para los seres humanos. Aunque se cree que la toxina accedería a la circulación sistémica comprometiendo el funcionamiento de la barrera epitelial del intestino, se desconoce el mecanismo  por el cual la toxina es absorbida. El presente trabajo se realizó con el fin de determinar el mecanismo de absorción de ETX y caracterizar sus efectos en el intestino delgado de roedores. Se utilizaron las técnicas de: enteropooling, ansas ligadas y perfusión para analizar los cambios en el transporte de fluidos in vivo. También se monitoreó la corriente de cortocircuito (CC) y la resistencia transepitelial (Rt) en tejidos montados en cámaras de Ussing tanto in vitro como ex vivo. Se realizó el análisis morfológico de los tejidos y la ubicación de un marcador de permeabilidad (HRP) mediante microscopia óptica y electrónica y el pegado de ETX por inmunofluorescencia. El tratamiento in vivo del ileon con ETX produjo cambios en el transporte de fluidos. In vitro, la adición de ETX del lado seroso produjo una caída de Rt aunque la incubación en dosis relativamente altas en el lado mucoso, no produjo ningún cambio con respecto al control. El análisis ex vivo del intestino delgado incubado luminalmente con ETX, resulto en la reducción de Rt y el incremento de CC. Se observó la distribucion de la toxina en el epitelio intestinal y los cambios morfológicos fueron observados a nivel de ultraestructura. Los resultados de este trabajo sugieren que ETX alteraría la permeabilidad paracelular del intestino delgado. Esto permitiría el pasaje de macromoléculas (como ETX), y a su vez explicaría el desbalance de fluidos observado, que sería producido por una reduccion en la absorción de agua.