EVALUACIÓN DE REGIONES DE LA CRUZIPAÍNA Y TRANS-SIALIDASA PARA SU USO EN VACUNAS DE SUBUNIDADES CONTRA INFECCIONES POR TRIPANOSOMA CRUZI

PROCHETTO ESTEFANIA ; DAIANA BERTONA; BONTEMPI IVAN; BURGI MA MILAGROS; IVAN S MARCIPAR; GABRIEL CABRERA

CABA

Congreso; XXVII Reunión Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

Sociedad Argentina de Protozoología

Previamente hemos descripto la inmunoprotección brindada por las proteínas trans-sialidasa (TS) y cruzipaína (Cz) de T.cruzi al ser formuladas con el adyuvante comercial ISCOMATRIX o con uno desarrollado por nuestro grupo basado enliposomas y QuilA (ISPA). Una característica común a todos los sistemas de expresión heteróloga es la dificultad paraexpresar proteínas de gran tamaño con un plegado correcto. Con el fin de identificar regiones antigénicas que puedan serexpresadas en diferentes sistemas, nos propusimos evaluar la inmunoprotección brindada por fracciones de la TS y Cz. Paraambas proteínas se seleccionaron fragmentos menores a 35kDa en base a información bibliográfica y predicciónbioinformática. Para la TS, se seleccionó un fragmento de ADN de 884 pb, y para la Cz se obtuvo un fragmento de 720 pb.Estos antígenos se expresaron en el sistema pET28a/E coli BL21-DE3 y se purificaron usando columnas de Niquel. Seinmunizaron ratones 3 veces cada 15 días con 10 ug de TS o Cz formulados con 5 ug de adyuvante liposomal ISPA o PBScomo control. Las inmunizaciones aumentaron los niveles séricos de anticuerpos IgG específicos contra TS o Cz. (DO±DS,n=5 por grupo) PBS: 0,05±0,01; CZ: 1,90±0,25, TS: 1,44±0,39, p 0,05; CZ: IgG1:0,76±0,22 vs IgG2a: 2,15±0,51, p