Receptores de canabinoides en células de la superficie ocular

IRIBARNE M; TORBIDONI V; PRESTIFILIPPO JP; RETTORI V; CASTAÑEDA M; BERRA A; SUBURO AM

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; 51a. Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El sistema endocanabinoide está envuelto en diversos mecanismos inmunomodulatorios, entre los que se destaca la inmunidad de la mucosa. Las células epiteliales de la superficie ocular juegan un importante rol en la defensa del ojo, no sólo como barrera mecánica sino también como participante activo en los procesos inmunológicos y alérgicos. Por lo tanto, estudiamos la presencia de receptores de canabinoides CB1 y CB2 en tejidos de ratón y en una línea celular derivada de la conjuntiva humana. Métodos: Se utilizaron ratones BALB-c machos. Una vez anestesiados fueron perfundidos con paraformaldehido al 4%. Alternativamente, los ojos fueron enucleados y congelados en fresco. Se  obtuvieron criosecciones que fueron incubadas con anticuerpos contra CB1 y CB2, y reveladas con un procedimiento inmunoenzimático amplificado con níquel. También se utilizaron monocapas de línea celular IOBA-NHC en confluencia que fueron estudiadas con los mismos procedimientos inmunohistoquímicos. Estas monocapas también fueron utilizadas para estudiar el efecto de agonistas canabinoides sobre los niveles intracelulares de AMPc, utilizando radioinmunoensayo. Resultados: Se observó una fuerte inmunoreactividad para CB1 y CB2 en la conjuntiva y en la córnea de ratón. También se detectó inmunoreactividad contra ambos receptores en células de la línea IOBA-NHC. En estas últimas, la inmunoreactividad mostró una distribución granular, sugiriendo la presencia de receptores en vesículas citoplasmáticas y en la membrana celular. Por otra parte, el agregado del endocanabinoide anandamida (AEA) a estos cultivos (0.5 mM) redujo los niveles intracelulares de AMPc. Conclusión: Fue posible detectar inmunoreactividad para los dos receptores de canabinoides, CB1 y CB2, en células del epitelio corneal y conjuntivo, y también en la línea celular derivada de la conjuntiva humana. La reducción de los niveles de AMPc intracelular en las células conjuntivas por efecto de la  AEA indica que dichos receptores son funcionales.