Evaluación de la respuesta inmune inducida por cepas de Mycobacterium tuberculosis resistentes a drogas

YOKOBORI N; GEFFNER L; SCHIERLOH P; ALEMÁN M; RITACCO V; VESCOVO M; GARCÍA A; LÓPEZ B; BARRERA L; DE LA BARRERA S; SASIAIN MC

Hotel 13 de Julio, Mar del Plata. Argentina.

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2006

Sociedad Argentina de Inmunología (SAI)

La tuberculosis multirresistente a drogas (MDR-TB) es causada por cepas de Mycobacterium tuberculosis (Mtb) resistentes, por lo menos, a isoniazida y rifampicina. En Argentina, se han detectado casos de MDR-TB causados por cepas autóctonas (cepas Muñiz, M, 410, 228 y Rosario, Rb). Por genotipificación (RFLP, IS6110) se clasificaron en cepas de alta y baja infectividad y/o virulencia: las cepas M y Rb presentan alta infectividad/virulencia, mientras que las cepas 410 y 228 no fueron transmitidas por más de una década. La inducción de apoptosis en macrófagos (MACs) es necesaria para la generación de respuesta protectiva contra micobacterias, facilita la presentación cruzada de antígenos a linfocitos T CD8+ y muerte de la bacteria intracelular. Por lo tanto los objetivos de nuestro estudio son: caracterizar la capacidad de las cepas Rv y M de inducir apoptosis y producir citoquinas en las células huésped (MACs) y determinar la capacidad de inducir proliferación celular. Se aislaron células mononucleares de sangre periférica de dadores sanos y pacientes con TB o MDR-TB. La obtención de MACs se realizó por adherencia. A los 7 días fueron pulsados con Mtb (cepas H37Rv, M y 410), analizándose marcadores de superficie y evaluándose la capacidad de inducir apoptosis con Anexina V/ioduro de propidio por citometría de flujo. Los resultados demostraron que la cepa Rv induce mayor apoptosis que la M a 1 y 4 horas (% AV+IP- a 1h: 45 ±12 vs 36±11, p< 0.05) no se observandose estas diferencias a las 18 horas. No se observaron diferencias significativas en los marcadores de superficie. Los ensayos de proliferación celular por incorporación de timidina 3H, demuestran que la cepa M en controles normales PPD+ induce menos activación que Rv y 410 (p< 0.05). La producción de TNF-a inducida por la cepa M en MACs está significativamente disminuida con respecto a la Rv. Estos resultados sugieren que la cepa M es más virulenta (inhibición de apoptosis) y menos antigénica (proliferación).