Activación del JAK2 y STAST3 por el complejo IL-6R en plaquetas de trombocitemia esencial.

CHAZARRETA CD; SALIM JP; MOLINAS FC; MARTA RF

Mar del Plata

Congreso; Congreso Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Activación de JAK-2 y STAT-3 por el complejo IL-6 y su receptor soluble en plaquetas de trombocitemia esencial. Carlos D. Chazarreta, Juan P. Salim, Felisa C. Molinas, Rosana F. Marta. Hematología Investigación, Instituto de Investigaciones Médicas A. Lanari, Facultad de Medicina, UBA   La IL-6 tiene un rol importante en el desarrollo megacariocítico ejerciendo su efecto a través de su receptor específico IL-6R y una glicoproteína de transducción de señal, gp130. Se ha descrito además, un receptor soluble, IL-6sR, con capacidad de unir IL-6 y asociarse a gp130 actuando como agonista en células que no tienen el receptor específico. En un trabajo previo describimos aumento plasmático de IL-6sR en pacientes con trombocitemia esencial (TE), enfermedad caracterizada por hiperplasia megacariocítica y aumento de plaquetas (plaq). El objetivo de este trabajo fue evaluar la vía de señalización de IL-6 estudiando el nivel de fosforilación de la tirosinquinasa JAK-2 y del factor de transcripción STAT-3 en plaq de pacientes con TE. Se evaluaron tres pacientes y dos controles. Las muestras se filtraron para eliminar los leucocitos, se lavaron y estimularon con a) 100 ng/ml de trombopoyetina (Tpo), b) 100 ng/ml de IL-6 (IL-6), c) 100 ng/ml de IL-6 + 200 ng/ml de IL-6sR (Complejo) d) sin estímulo. Las muestras se sometieron a SDS-PAGE, transferencia e inmunoblotting usando anti fosfoJAK-2, anti fosfoSTAT-3 y anti JAK-2 y anti STAT-3, estos últimos para evaluar JAK-2 y STAT-3 total . Se obtuvo la relación (Rel) dividiendo la intensidad de las banda obtenida para STAT-3P por la del STAT3 total y se calculó el cociente entre la Rel inducida por el complejo (RelComplejo) y la Rel inducida por Tpo (RelTpo). Los pacientes presentaron una RelComplejo/RelTpo aumentada, 2.2 (1.86-3.03) (mediana y rango), respecto a los normales 0.72 (0.64-0.8) demostrando un aumento del nivel de fosforilación de STAT3 inducida por el complejo. En cambio, el nivel de fosforilación de JAK-2 fue similar en pacientes y controles en estas condiciones. Estos resultados sugieren que el complejo IL-6/IL-6sR tendría mayor capacidad de activar STAT-3 en pacientes con TE  y que esta activación podría ser independiente de JAK-2.