INVESTIGADORES
SEIJO Jose Guillermo
congresos y reuniones científicas
Título:
11. El uso de FISH y GISH en el estudio de parentescos en en Arachis (Leguminosae).
Autor/es:
SEIJO, J.G
Lugar:
Pergamino Buenos Aires
Reunión:
Simposio; Simposio GISH. XXXVI Congreso Argentino de Genética,; 2007
Institución organizadora:
SAG
Resumen:
El maní (A.hypogaea) es una especie alotetraploide (2n=4x=40, AABB) que presenta gran variación morfológica reconociéndose dos subespecies y seis variedades botánicas. Sin embargo, los marcadores moleculares convencionales han revelado escaso polimorfismo en las secuencias nucleotídicas y no presenta resistencia a muchas enfermedades y pestes que lo afectan. Por el contrario, las especies silvestres son genéticamente diversas y constituyen una importante fuente de caracteres agronómicos. En este marco, se desarrolla una extensa caracterización de las entidades silvestres de Arachis a fin de identificar los materiales que presenten características de interés y que, a su vez, puedan ser fácilmente incorporados a los cultivares comerciales por métodos tradicionales. Este último aspecto implica el desarrollo de estrategias que nos permitan determinar las relaciones genómicas existentes entre el germoplasma silvestre y el cultígeno. Nuestro grupo de trabajo ha abordado este objetivo empleando técnicas de hibridación in situ fluorescente de sondas construidas a partir de familias génicas, ADN repetitivo y ADN genómico. En este trabajo se presentan los resultados obtenidos en la sección Arachis, constituida por dos especies tetraploides, el cultígeno y la silvestre A.monticola, y 30 diploides (2n=2x=20, 2n=2x=18). La hibridación de ADNr 5S y 45S ha demostrado gran afinidad genética entre el cultígeno y A.monticola, sustentándose el surgimiento del primero por domesticación del segundo. También se ha propuesto a A.ipaensis (BB) y A.duranensis (AA) como los progenitores de los tetraploides. Sin embargo, A.correntina y A.villosa presentan similar distribución de los ADNr que A.duranensis, por lo cual no pueden descartarse como posibles parentales. El empleo de doble GISH ha demostrado que de las doce combinaciones ensayadas sobre A.hypogaea, aquella con las sondas de A.duranensis y A.ipaensis presentó el mejor patrón de hibridación, tanto en intensidad de fluorescencia como en uniformidad de cobertura. Utilizando esta combinación, el ADN genómico de A.duranensis hibridó preferentemente con 20 cromosomas, todos con bandas heterocromáticas, y el ADN de A.ipaensis lo hizo con los 20 cromosomas restantes, todos sin bandas heterocromáticas. Con respecto a las investigaciones llevadas a cabo para inferir los mecanismos de diferenciación genómica se han ensayado diferentes secuencias que presentan homologías con retrotransposones. Cuatro de estas sondas hibridaron preferentemente con los cromosomas del genoma A y una con el genoma B de A.hypogaea. Los patrones de hibridación observados muestran que todas las secuencias son dispersas y propias de la eucromatina siguiendo un patrón semejante al observado en los GISH. Además, se han aislado secuencias repetidas, para las cuales no se han encontrado secuencias homólogas en las bases de datos, pero que hibridan exclusivamente en las bandas heterocromáticas del genoma A y otra que coincide con la distribución de los sitios de ADNr 45S (probablemente en los IGS). EL empleo de ISH ha permitido la caracterización de las especies de la sección, identificar las entidades más afines al cultígeno e identificar algunas de las secuencias que han contribuido a la diferenciación genómica del grupo.