Efecto Apoptotico de un análogo de GnRH (acetato de Leuprolide) sobre una línea establecida de células de Granulosa Bovina

CAROU, MC.; LOMBARDO DM.M; SOÑEZ, MC.; MEDINA, JM.

Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires (UNCPBA), Tandil, Pvcia.de Buenos Aires

Congreso; X Congreso Argentino de Ciencias Morfológicas; 2006

Sociedad Argentina de Morfología. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires (UNCPBA)

&amp;lt;!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:"Cambria Math"; panose-1:2 4 5 3 5 4 6 3 2 4; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:roman; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:-1610611985 1107304683 0 0 159 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-unhide:no; mso-style-qformat:yes; mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman","serif"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} .MsoChpDefault {mso-style-type:export-only; mso-default-props:yes; font-size:10.0pt; mso-ansi-font-size:10.0pt; mso-bidi-font-size:10.0pt;} @page WordSection1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.WordSection1 {page:WordSection1;} --&amp;gt; Efecto apoptótico de un análogo de GnRH (acetato de Leuprolide) sobre una línea establecida de células de Granulosa Bovina. Carou MC., Lombardo DM.,  Soñez MC. y Medina J. Histología y Embriología. Facultad de Cs. Veterinarias. UBA. E-Mail: mccarou@fvet.uba.ar   Es sabido que la GnRH se expresa también en el tejido ovárico. Receptores GnRH (GnRHR) se han identificado en las células de la granulosa y lutéales. La activación del GnRHR en la granulosa conduce a la estimulación o inhibición de la función gonadal. Análisis in Vivo e in Vitro de la regulación hormonal con agonistas de GnRH (GnRH-a) demostraron un incremento de los folículos atrésicos en ovarios de ratas. Así también se determinó que la administración in Vivo de GnRH-a incrementa la muerte celular por apoptosis en tejido ovárico y en CG. El objetivo del trabajo es analizar in Vitro si un agonista de GnRH,el acetato de Leuprolide (LA), tiene efecto apoptótico sobre  una línea establecida de células de granulosa bovina (BGC). Para ello, se ensayaron tres tiempos de activación (6, 12 y 24 hs) y tres dosis de LA (1, 10 y 100 nM), bajo dos condiciones experimentales (0 y 5% de suero fetal bovino, SFB). Se realizaron tres experimentos por triplicado analizando los resultados por un ANOVA de dos vías y un test de comparación de medias de Bonferroni. El índice de apoptosis fue determinado en base a la tinción cromatínica con DAPI validando los resultados por TUNEL. El análisis y comparación de los resultados muestran activación de la apoptosis y diferencia significativa respecto del control (44% activación, p <0,0001) a las 24 hs de incubación en presencia de 5% SFB y 100 nM de LA. Este resultado fue validado mediante la técnica de TUNEL, encontrándose en las mismas condiciones un 39% de activación. Similares resultados fueron obtenidos en células de granulosa bovina provenientes del cultivo primario de folículos de tamaño mediano (5 a8 mm). Finalmente concluimos que el LA activa la apoptosis en el sistema de BGC y para estas condiciones experimentales.   Palabras Claves: Granulosa; Apoptosis; GnRH; Leuprolide.