Generación de inmunidad protectiva frente a T. gondii empleando un microorganismo atenuado como sistema de delivery de pGRA4.

GONZALEZ COBIELLO P; CERNY N; SANCHEZ V; GOLDMAN A; MALCHIODI E; MARTIN V; FRANK FM

Santa Fe, Argentina

Congreso; XXIII Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2009

Sociedad Argentina de Protozoología

GRA4 es una proteína de los gránulos densos que desencadena respuesta a nivel sistémico y de mucosastras la infección murina experimental. En la búsqueda de herramientas que lleven al desarrollo de una vacunapreventiva, evaluamos la utilidad de Salmonella entérica atenuada (S) como sistema de delivery de pGRA4. De esta forma empleamos la vía habitual de infección, oral, para la inmunización. Como estrategias paraintentar mejorar la respuesta evaluamos la coadministración con el gen de GM­CSF o un refuerzo con GRA4 adyuvada por Sales de Aluminio. Para esto, ratones hembras C3H/HeN fueron inmunizados con 4 dosis deS.pGRA4   sola   (G1)   o   acompañada   de   S.pGM­CSF   (G2),   o   bien   2   dosis   de   S.pGRA4   +   2   dosis   de GRA4+Alum  (G3).  Solo  los ratones  del  G3 presentaron  altos  títulos   sistémicos de IgG específicos,  sin embargo los 3 grupos mostraron una importante respuesta de DTH sin diferencias entre sí. Quince días después de la última inmunización, los ratones se desafiaron por vía ora con quistes de la cepa Me49midiéndose la protección conferida mediante recuento de quistes cerebrales. La respuesta obtenida fue capaz de reducir significativamente la carga parasitaria (entre 44 y 56%) en los grupos inmunizados y prevenir elaumento sérico de LDH, enzima marcadora de daño tisular.  Tras la infección, los títulos de IgG específicos se vieron incrementados hasta 13 veces en el G3 y 8 veces enel G1, respecto al control sin inmunizar, mientras que el G2 presentó sólo un incremento de 2 veces. Estos resultados demuestran que  la  inmunización por  vía oral empleando Salmonella  como  sistema de delivery del gen de GRA4 genera protección frente al desafío, sin necesidad de adyuvantes agregados. Trabajos previos demostraron que la respuesta generada por administració pGRA4 desnudo, es mejoradapor el agregado del pGMCSF. En este trabajo, al emplear Salmonella como sistema de delivery del plásmido,la respuesta no ofrece mayor protección al ser coadministrada con una citoquina o tras el boost con proteína.