Efecto del estrés agudo en el desarrollo de shock endotóxico en ratón. Papel de la óxido nítrico sintasa (NOS) expresada constitutivamente en macrófagos

ORQUEDA A; BARREIRO ARCOS ML; SILBERMAN DM; CREMASCHI GA; GENARO AM

Mar del Plata

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

SAI, SAIC, SAFIS, SAFE, SAN, SABiol, SABiof

El óxido nítrico generado por la isoforma inducible de la NOS juega un papel fundamental en la cascada de eventos que llevan a la muerte durante el shock endotóxico.  La exposición a estrés agudo modula muchos aspectos de la función inmune. Se han descripto tanto efectos protectores como nocivos del estrés agudo en el desarrollo de procesos inflamatorios, aunque los mecanismos involucrados no han sido dilucidados.   En particular, el papel de la eNOS expresada constitutivamente en macrófagos (M) no ha sido considerado.  El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto del estrés agudo por inmovilización  sobre el curso del shock endotóxico inducido por administración de lipopolisacáridos bacterianos (LPS) en ratones BALB/c.  Además analizar la  actividad de NOS determinada por formación de 14C-citrulina   en los M peritoneales de estos ratones.  Las curvas de letalidad realizadas para un rango de dosis de LPS de 2.4 – 6.4  mg/kg de peso en función del tiempo, mostraron un efecto dual del estrés: protector a altas dosis y nocivo a bajas dosis (p<0.05, n= 4).  La actividad de NOS en macrófagos controles  (N) luego de 4 horas de inyectados con LPS mostró una correlación positiva con la dosis administrada ( X±ES, pmoles/ 107 células, LPS 2.4= 10.3±2.8, LPS  4.8= 18.1±2.3, n=4).  Esta relación dosis-respuesta se perdió en los ratones estresados (E).  El anàlisis de la expresión de isoformas de NOS por Western-blot, indicó una disminución de la eNOS en los E (pixeles, N=75477±7329, E=20512± 5422, n=3)  y la expresión de la iNOS, ausente en los N.   Estos resultados indican que el estrés agudo a traves de la modulación de la actividad de eNOS regula la producción de NO inducida por inyección de LPS modificando el curso de la respuesta endotóxica.  Los mecanismos moleculares que regulan esta interacción están siendo analizados.