INICSA   23916
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN CIENCIAS DE LA SALUD
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Validación de la técnica no invasiva para la determinación de metabolitos de cortisol en materia fecal de Alouatta caraya.
Autor/es:
CANTARELLI VI; KOWALEWSKI M; PEREZ RUEDA A; PONZIO MF
Lugar:
Córdoba
Reunión:
Congreso; XXII CONGRESO Asociación Latinoamericana de Parques Zoológicos y Acuarios.; 2015
Institución organizadora:
ALPZA
Resumen:
La cuantificación de glucocorticoides
circulantes como parámetro de estrés, es una herramienta útil para el monitoreo
y mejoramiento del bienestar animal tanto en zoológicos como en vida silvestre.
En primates, el principal glucocorticoide es el cortisol, que aparece en heces
en forma de conjugados. Esto permite la aplicación de la técnica no invasiva
evitando la manipulación, el estrés y los riesgos asociados con la captura de
individuos. En este trabajo nos propusimos realizar la validación bioquímica y
fisiológica del inmunoensayo enzimático (EIA, cortisol R4866, Department
of Population Health and Reproduction,
Coralie Munro, UC Davis, CA, USA) utilizado para la determinación de
metabolitos de cortisol en materia fecal de Alouatta
caraya. Las pruebas de paralelismo realizadas sobre las muestras fecales de
0,5 y 1 gr, extraídas con metanol al 80%, arrojaron resultados negativos. Se
determino que el metanol interfería en la unión hormona-anticuerpo, procediendo
a desecar los extractos antes del EIA, obteniendo así curvas de desplazamiento
paralelas a la de estándares de cortisol (r2=0,98). Los extractos
desecados se recuperaron en buffer fosfato (1:6). Los porcentajes de
recuperación de concentraciones conocidas de estándares de cortisol, agregadas
a una dilución seriada de un pool de muestras de materia fecal, fueron de
68,7±18,02%. Las concentraciones hormonales obtenidas se correlacionaron con
las concentraciones esperadas (r²=0.96; p<0,01). A fin de establecer la validez biológica, se
analizaron mediante EIA muestras recolectadas de cuatro individuos (dos machos
y dos hembras) del Zoológico de Corrientes, antes y después de la
administración exógena de ACTH (5 U.I./kg), para la inducción de la actividad
corticoadrenal. Los niveles de metabolitos de cortisol encontrados después de
la inyección fueron tres veces superiores al basal. Por otro lado, en tres de
los cuatro animales se presentó un pico excretorio de gran magnitud aun antes
de la administración de ACTH que pudo deberse a la gran concurrencia de público
el día anterior. Los resultados obtenidos proveen evidencias suficientes de la
especificidad del EIA utilizado. Se observó variación en las concentraciones
máximas excretadas (4591,8 y 27420,6 ng/g en los machos y de 9516 y 8936,4 ng/g
en las hembras) así como también en el tiempo de aparición en heces (~20-100 horas post-inyección), que puede reflejar
diferencias individuales en la respuesta al estrés, preferencias en la dieta y
en la ingesta de líquidos. La disponibilidad del método validado en el presente
trabajo, constituye una herramienta útil para estudiar más profundamente la
fisiología del estrés en el carayá.