La sobreexpresión del Módulo de Unión a Carbohidratos de la EXPANSINA 2 de frutilla en Arabidopsis afecta la expresión de genes del catabolismo de pared y aumenta la resistencia a infección por Botrytis cinerea.

NARDI, C; VILLARREAL NM; ROSSI, F; MARTÍNEZ GA; CIVELLO, PM

Chascomús

Congreso; XV Jornadas Anuales de la Sociedad Argentina de Biología; 2013

Sociedad Argentina de Biología

Los Módulos de Unión a Carbohidratos (CBM) son dominios funcionales presentes en enzimas involucradas en el metabolismo de polisacáridos, que otorgan la capacidad de unión a carbohidratos. Las expansinas son proteínas no hidrolíticas que participan en el desensamblaje de la pared celular y poseen una estructura característica que incluye un CBM en su extremo C-terminal, por medio del cual se uniría a los polímeros de pared. En este trabajo se muestra el efecto producido por la sobreexpresión del CBM de la EXPANSINA 2 de frutilla (CBMFaEXP2) en Arabidopsis thaliana. En primer lugar, se realizó una fusión entre la secuencia que codifica el péptido señal de la EXPANSINA 8 de Arabidopsis con CBMFaEXP2, con el objeto de dirigir  este último a la vía secretora, y se obtuvieron las plantas de Arabidopsis transgénicas.Paralelamente, se  transformaron plantas con otra construcción incluyendo el péptido señal y el gen para GFP, a fines de confirmar la localización subcelular mediante microscopía confocal.  Además, se midió la expresión de genes involucrados en el catabolismo de la pared celular, obteniendo un menor nivel de expresión en las plantas transgénicas con respecto a las tipo salvaje (WT). Previamente hemos demostrado que la sobreexpresión de CBMFaEXP2 confiere un aumento en el contenido de pared celular total, lo que provoca que las mismas sean más gruesas al compararlas con las WT. Por esto se evaluó el daño necrótico causado por Botrytis cinerea, observándose una disminución del área necrótica en las plantas transgénicas respecto a las de WT. Se concluye que la sobreexpresión de CBMFaEXP2 es capaz de alterar el metabolismo de los genes de la pared celular y aumenta la resistencia al daño causado por el hongo necrotrófico B. cinerea.