PARTICIPACIÓN DE LA IL-1 EN LA PROMOCIÓN DE LA APOPTOSIS MEDIADA POR TNF-ALFA EN GRANULOCITOS NEUTROFILOS HUMANOS

SALAMONE G; ALVAREZ ME; COSTAS MÓNICA A; TREVANI AS; NAHMOD KAREN; VERMEULEN ME; FUXMAN BASS J; GEFFNER J

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2004

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente demostramos que el TNF-alfa ejerce un efecto promotor de la apoptosis del neutrófilo, permitiendo a diversos agonistas actuar como poderosos promotores de la misma. En este trabajo evaluamos si citoquinas que han sido descriptas como antiapoptóticas sobre neutrófilos en reposo, eran capaces de modular la inducción de apoptosis en neutrófilos primadoscon TNF-alfa. Los neutrófilos fueron preincubados con TNF-alfa (10 ng/ml) en ausencia o presencia de IL-1, IL-6 o IL-8 (10 ng/ml) y luego expuestos durante 3 hs a diferentes agonistas: Zimozán (50ng/ml), IgG inmovilizada (IgGi) o el factor estimulador de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF,100ng/ml). Mientras que la IL-6 y la IL-8 no modularon la progresión a la apoptosis, las IL-1alfa e IL-1beta (10ng/ml) indujeron un incremento significativo (p<0.01) en el porcentaje de células apoptóticas, para todos los agonistas ensayados. Esta acción estimulatoria de la apoptosis mediada por IL-1 se asoció a una expresión disminuida de la proteína antiapoptótica Mcl-1, por ensayos de Western Blot. Observamos, por otra parte, que el bloqueo del receptor de IL-1, mediante el empleo de un antagonista específico, inhibió significativamente (p<0.01) la inducción de apoptosis en células pretratadas con TNF-alfa y luego expuestas a IgGi, sugiriendo que la producción autócrina de IL-1 en neutrófilos pretratados con TNF-alfa participa en la estimulación del fenómeno apoptótico. Los resultados obtenidos muestran que el pretratamiento de los neutrófilos con TNF-alfa subvierte el modo en el cual éstos perciben su entorno, permitiendo a una citoquina antiapoptótica como la IL-1 (definida como tal en función de la acción ejercida sobre neutrófilos en reposo) mediar un efecto promotor de la apoptosis. de modular la inducción de apoptosis en neutrófilos primadoscon TNF-alfa. Los neutrófilos fueron preincubados con TNF-alfa (10 ng/ml) en ausencia o presencia de IL-1, IL-6 o IL-8 (10 ng/ml) y luego expuestos durante 3 hs a diferentes agonistas: Zimozán (50ng/ml), IgG inmovilizada (IgGi) o el factor estimulador de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF,100ng/ml). Mientras que la IL-6 y la IL-8 no modularon la progresión a la apoptosis, las IL-1alfa e IL-1beta (10ng/ml) indujeron un incremento significativo (p<0.01) en el porcentaje de células apoptóticas, para todos los agonistas ensayados. Esta acción estimulatoria de la apoptosis mediada por IL-1 se asoció a una expresión disminuida de la proteína antiapoptótica Mcl-1, por ensayos de Western Blot. Observamos, por otra parte, que el bloqueo del receptor de IL-1, mediante el empleo de un antagonista específico, inhibió significativamente (p<0.01) la inducción de apoptosis en células pretratadas con TNF-alfa y luego expuestas a IgGi, sugiriendo que la producción autócrina de IL-1 en neutrófilos pretratados con TNF-alfa participa en la estimulación del fenómeno apoptótico. Los resultados obtenidos muestran que el pretratamiento de los neutrófilos con TNF-alfa subvierte el modo en el cual éstos perciben su entorno, permitiendo a una citoquina antiapoptótica como la IL-1 (definida como tal en función de la acción ejercida sobre neutrófilos en reposo) mediar un efecto promotor de la apoptosis.