Detección de expresión diferencial de quimoquinas en epitelio intestinal absorptivo y epitelio asociado a folículos (FAE) empleando microscopía de disección.

RUMBO M; SIRARD JC

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LVI Reunion anual Sociedad Argentina de Inmunologia; 2006

Sociedad Argentina de Inmunologia

La homeostasis del sistema inmune de mucosas es mantenida por una compleja serie de interacciones, siendo crítica la precisa distribución histológica de distintas poblaciones del sistema inmune. El epitelio intestinal es capaz de producir distintas quimoquinas y mediadores de la respuesta inmune. Su producción en distintas regiones del epitelio intestinal es presumiblemente diferente, sin embargo ha sido poco documentada. Nuestro objetivo fue analizar la expresión de quimoquinas por el epitelio intestinal en el eje cripta-vellosidad y en epitelio asociado a folículos (FAE). Se analizaron ratones BALB/C hembras de 5 a 7 semanas de edad. Se seleccionaron distintas regiones del epitelio absorptivo (criptas y vellosidades) o del FAE empleando un microscopio de disección Leica DM-LB siguiendo un protocolo optimizado para preservar la integridad del RNA. Se obtuvo el RNA total y se determinaron los niveles de expresión por RT y PCR en tiempo real. Como tejido no epitelial se analizaron folículos de las Placas de Peyer (FPP). Los genes analizados mostraron distinto patrón de expresión. CX3CL1 y CCL15 mostraron una expresión en tejido epitelial (FAE, cripta y vellosidad) entre 15 y 25 veces superior a la observada en folículo linfoide. CCL25 mostró aumento de expresión en criptas y FAE de alrededor de 30 veces con respecto a su expresión en FPP, siendo indetectable en el epitelio vellositario. CXCL12 se expresa en forma detectable en epitelio vellocitario y en FPP. Entre los genes expresados exclusivamente en una región se encuentran CCL20 y CCL9 (FAE, incremento de 52 +/- 8 y 21,2 +/- 3,8 veces respectivamente), B-defensina 1 y  (cripta, incremento de 1200+/-300 veces) y CXCL13 (FPP, incremento de 25,4 +/-3,0 veces) siendo baja o indetectable en otras regiones. El epitelio juega un papel en el reclutamiento diferencial de poblaciones de células a distintos sitios histológicos contribuyendo al normal funcionamiento del sistema inmune de mucosas.