Modulación de la expression de factores modificadores de histonas en cálulas madre embrionarias humanas

LUZZANI C; SCASSA ME; ROMORINI L; LOSINO N; SEVLEVER G; BARAÑAO L; MIRIUKA SG; GUBERMAN AS

Mar del Plata

Congreso; LIV Reunion Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2009

SAIC

Las Células Madre Embrionarias (CME) poseen la capacidad de proliferar indefinidamente in vitro, sin presentar cambios en su fenotipo. A su vez, pueden ser diferenciadas a células de cualquier linaje con excepción de tejidos extraembrionarios. El balance entre estos dos destinos depende de una fina regulación de la expresión de genes específicos dirigida por señales externas a la célula. Existen, además, cambios en la organización de la cromatina a nivel global y de loci específicos. Por otra parte, los tejidos embrionarios se desarrollan en un ambiente hipóxico en las primeras etapas del desarrollo. Si bien aún no está claro el efecto de la hipoxia sobre CME, se ha reportado que la exposición de las mismas a una tensión de oxígeno baja (de 1-3%) favorece el mantenimiento del estado indiferenciado. Nuestra hipótesis es que ciertos factores de transcripción específicos de CME como Oct3/4, SOX2 y Nanog podrían estar regulando la expresión de genes que codifican para ciertas enzimas modificadoras de la cromatina y que durante la diferenciación o en condiciones de bajas concentraciones de oxígeno, se modifica su perfil de expresión. Mediante inmunofluorescencia y RT-PCR comprobamos el estado de diferenciación celular de CME humanas de la línea HUES-9. Posteriormente, por RT-PCR y RT-qPCR analizamos la expresión de diversos genes de enzimas modificadoras de la cromatina. Encontramos que en CME indiferenciadas se expresan tanto enzimas con actividad acetilasa de histonas (Myst2, GTF3C3, GTF3C4 y Gcn5l2) como deacetilasas (HDAC2, HDAC3 y HDAC5), metiltranferasas de histonas (SETDB1, Ehmt2, PRMT1, Suv39h1 y Suv39h2) y un factor perteneciente al Complejo Represor Polycomb 1, Bmi-1. Nuestros resultados muestran, además, que los perfiles de expresión de algunas de estas proteínas varían con la diferenciación y/o con la disponibilidad de oxígeno, sugiriendo que la regulación de la expresión de la maquinaria de remodelación de la cromatina es importante para estos procesos.