Regulación de la apoptosis sobre una línea establecida de células de granulosa bovina (BGC-1) con un análogo de GnRH (Acetato de Leuprolide) y un antagonista (Antide).

CRUZANS, PR; CAROU, MC.; REVILLA M.; LOMBARDO, DM

Facultadde Cs.Veterinarias. UBA, Buenos Aires

Jornada; Primeras Jornadas Internacionales del Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal – INITRA.; 2008

Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal (INITRA), Facultad de Ciencias Veterinarias. UBA

<!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:"Cambria Math"; panose-1:2 4 5 3 5 4 6 3 2 4; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:roman; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:-1610611985 1107304683 0 0 159 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-unhide:no; mso-style-qformat:yes; mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman","serif"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} p.MsoBodyText, li.MsoBodyText, div.MsoBodyText {mso-style-unhide:no; mso-style-link:"Texto independiente Car"; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; text-align:justify; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman","serif"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} a:link, span.MsoHyperlink {mso-style-unhide:no; color:blue; text-decoration:underline; text-underline:single;} a:visited, span.MsoHyperlinkFollowed {mso-style-noshow:yes; mso-style-priority:99; color:purple; mso-themecolor:followedhyperlink; text-decoration:underline; text-underline:single;} span.TextoindependienteCar {mso-style-name:"Texto independiente Car"; mso-style-unhide:no; mso-style-locked:yes; mso-style-link:"Texto independiente"; mso-ansi-font-size:12.0pt; mso-bidi-font-size:12.0pt;} .MsoChpDefault {mso-style-type:export-only; mso-default-props:yes; font-size:10.0pt; mso-ansi-font-size:10.0pt; mso-bidi-font-size:10.0pt;} @page WordSection1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.WordSection1 {page:WordSection1;} --> REGULACIÓN DE LA APOPTOSIS SOBRE UNA LÍNEA ESTABLECIDA DE CÉLULAS DE GRANULOSA BOVINA (BGC-1) CON UN ANÁLOGO DE  GNRH (ACETATO DE LEUPROLIDE) Y UN ANTAGONISTA (ANTIDE).   Cruzans PR,  Carou MC., Revilla M, Lombardo DM. Área Histología y Embriología. Facultad de Cs. Veterinarias, INITRA, UBA.  mccarou@fvet.uba.ar   Se han identificado receptores de la hormona liberadora de gonadotropina (GnRHr) en células de granulosa ovárica (CG) y luteales. La activación de GnRHr en la CG conduce a la estimulación o inhibición de la función gonadal. Experienciasin vivo e in vitro de la regulación hormonal con agonistas de GnRH, demostraron en ovarios de ratas un incremento en la atresia folicular. Así también, se determinó que la administración in vivo de un análogo de GnRH (GnRH-a) incrementa la muerte celular por apoptosis en tejido ovárico y en CG. Estudios previos de nuestro laboratorio, identificaron un aumento significativo en la proporción de células BGC-1 apoptóticas inducidas durante 24 y 48 Hs con 100 nM  de Acetato de Leuprolide (LA) mediante técnicas de DAPI,  TUNEL y Anexina V. A los efectos de corroborar y analizar de manera más específica y desde otro punto de vista estos resultados, el propósito del presente trabajo fue comprobar la especificidad del proceso de regulación de la apoptosis con LA mediante el análisis del proceso en presencia de un antagonista de GnRH (ANTIDE). Se realizaron tres ensayos por triplicado para la determinación de apoptosis por tinción con hematoxilina (análisis morfológico), y dos experimentos por triplicado para la determinación de apoptosis por  citometría de flujo (FACS) mediante la marcación de las BGC-1 con Anexina V-FITC y IP, analizando los resultados por ANOVA de dos vías y análisis de comparación de medias de Bonferroni. El análisis morfológico confirmó los resultados obtenidos previamente para la incubación por 24 Hs con 100 nM de LA. El tratamiento con LA arrojó un índice de activación de 2,16 p= 0.035. Observándose además, que este efecto fue parcialmente inhibido por la preincubación del cultivo celular con 100 nM de ANTIDE (IA= 1,48 p= 0.035). Esto estaría indicando una protección del 68%. De los resultados obtenidos, postulamos que el antagonista “per se” no modifica significativamente el comportamiento del control. Los datos obtenidos por citometría de flujo confirman lo observado con hematoxilina. Por lo tanto el efecto inductor de apoptosis en BGC-1 por parte del LA es específico y se da a través del GnRHr.