Inmunógenos quiméricos como potenciales vacunas subcelulares en brucelosis

LAPLAGNE D, CASSATARO J., ESTEIN S., BRUNO L., GIAMBARTOLOMEI G., FOSSATI A., GOLDBAUM F., BOWDEN R.A.

Mar del Plata

Otro; L Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2002

SAI

Inmunógenos quiméricos como potenciales vacunas subcelulares en brucelosis Laplagne D., Cassataro J. Estein S.M., Giambartolomei G. Fossati C.A.Bowden R.A., Goldbaum F., Laboratorio de Inmunoquímica y biotecnología, Facultad de Ciencias Veterinarias, UNICEN, 7000 Tandil. IDEHU-CONICET, Fac. Farmacia y Bioquímica, UBA, Junín 951, Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Bioquímicas, Fundación Campomar, Buenos Aires. La proteína de membrana externa Omp31 de Brucella spp. es un antígeno inmunodominante capaz de inducir protección. En las especies/cepas rugosas, Omp31 es accesible a los anticuerpos y posee un epitope B protector en un bucle hidrofílico expuesto; su inmunogenicidad podría aumentar presentándolo en multicopia sobre un soporte apropiado. La lumazina sintetasa de Brucella spp., es un pentámero estable y muy inmunogénico que contiene sitios expuestos capaces de aceptar péptidos foráneos, permitiendo la creación de quimeras. Ambas proteínas han sido obtenidas en forma recombinante. En este caso, se obtuvo una quimera compuesta por la BLS, más 27 aa. del péptido de Omp31 (repetido 5 veces). Ëste es el 9% de Omp31 y 15% de la quimera BLS-Omp31. Además se construyó una quimera genética análoga para su estudio como vacuna a ADN. La inmunogenicidad fue estudiada en ambos casos. En el caso de la proteína, los ratones BALB/c, recibieron dos dosis de 30 ug de Omp31 o BLS-Omp31 en Adyuvante de Freund incompleto (equivalente proteína), o bien de 50ug Omp31 y 30 ug de BLS-Omp31 (equivalente a 4,5 ug de péptido). Para la quimera genética, se inyectaron en cuatro oportunidades 100ug de plásmido. Los anticuerpos fueron estudiados por ELISA indirecto usando rOmp31 como antígeno. Tanto los ratones inmunizados con Omp31 como con BLS-Omp31 (proteína) desarrollaron anticuerpos anti-Omp31, en ambos diseños (equivalente proteína o péptido), pero con nivel significativamente mayor en la inmunización con Omp31. En la inmunización con ADN, la cinética fue más lenta, y, curiosamente, la quimera BLS-Omp31 indujo mayor nivel de anticuerpos anti-Omp31. Se demuestra que un sólo péptido de Omp31, en un contexto apropiado, induce Ac en niveles importantes y que estos pueden modularse eligiendo diferentes estrategias de intervención inmunitaria.