ATP estimula la proliferación de células osteoblásticas y tumorales mamarias a través de la vía de señalización PI3K/Akt

KATZ SEBASTIÁN,; SCODELARO BILBAO, PAOLA GABRIELA; BOLAND, RICARDO; SANTILLÁN GRACIELA

Mar del Plata

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La vía de señalización de la fosfatidil inositol 3-quinasa (PI3K)/Akt ha sido implicada en la regulación de la proliferación celular y oncogénesis. Previamente, demostramos que la estimulación de receptores P2Y2/4 por ATP induce la fosforilación de Akt en serina 473 en forma dependiente de PI3K en células osteoblásticas ROS 17/2.8 y tumorales mamarias MCF-7. En estas últimas, la activación de Akt por ATP fue, además, dependiente de Src y PKC e independiente del influjo de Ca2+. En este trabajo se estudió la modulación de la vía PI3K/Akt por ATP en células ROS 17/2.8 y su contribución a la proliferación celular en ambas líneas celulares. Mediante análisis de Western blot se observó que el uso de PP1, un inhibidor de Src, disminuyó la activación de Akt inducida por ATP en células ROS 17/2.8. La incubación de las células en un medio libre de Ca2+ (+EGTA 0,5 mM) inhibió el efecto del ATP sobre la activación de Akt, mientras que no se observaron cambios en presencia de nifedipina y verapamil, inhibidores de canales VDCC ó Ro318220, un inhibidor de PKC. El empleo de Ly294002 y wortmanina, inhibidores de PI3K, sugiere que la fosforilación de las MAPKs ERK1/2, p38 y p46 JNK por ATP es independiente de PI3K. Mediante ensayos de MTS se demostró que ATP y UTP ~10 mM incrementan la viabilidad celular luego de 24 y 72 hs en ambas líneas celulares, respectivamente. Efecto que fue inhibido por Ly294002 y wortmanina. Estos resultados sugieren que, similarmente a lo observado en células MCF-7, la activación de Akt es dependiente de Src. Sin embargo, en las células osteoblásticas, la activación de Akt evidenció ser independiente de PKC y dependiente del influjo de Ca2+ a través de canales distintos a VDCC. En ambos tipos celulares, la vía PI3K/Akt participa en los efectos mitogénicos inducidos por ATP. Estos datos podrían ser de potencial relevancia en fisiología ósea y en el diseño de nuevas estrategias terapéuticas frente a transformaciones tumorales.