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En trabajos anteriores hemos demostrado que las purinas (ATP/ADP y adenosina) inducen inhibición presináptica de la liberación de ACh a través de un mecanismo multimodal: disminuyendo la entrada de Ca2+ a la terminal nerviosa y modulando algún paso del proceso exocitótico posterior a la entrada de Ca2+. Nuestro objetivo fue investigar los mecanismos de transducción intracelular involucrados en la acción de las purinas sobre la maquinaria de liberación. En diafragmas de ratones CF1 se estudió el efecto de CCPA y 2-MeSADP (agonistas de los receptores de adenosina A1 y de ATP P2Y12/13 respectivamente) sobre la respuesta hipertónica (RH, incrementa la frecuencia de potenciales de placa miniatura por un mecanismo independiente al Ca2+) en presencia de antagonistas de diferentes vías de señalización. Se demostró que el inhibidor de PKA H-89 no previene el efecto modulador de CCPA y 2-MeSADP sobre la RH (CCPA: pico RH 60.9 ± 6.0 % del control p<0.05, área bajo la curva 58.7 ± 2.8 % del control p<0.05, n=4; H-89+CCPA: pico 64.0 ± 1.2 % p<0.05, área 81.7 ± 3.7 % p<0.05, n=4; 2-MeSADP: pico 54.7 ± 4.8 %, p<0.05, área 61.8 ± 3.0 %, p<0.05, n=4; H-89+2-MeSADP: pico 59.4 ± 4.2 %, p<0.05, área 68.8 ± 4.2 %, p<0.05, n=4), mientras que el inhibidor de PKC cheleritrina no modificó el efecto de CCPA pero si el de 2-MeSADP (cheleritrina+CCPA: pico 63.1 ± 7.3 %, p<0.05, área 73.5 ± 2.2 %, p<0.05, n=3; cheleritrina+2-MeSADP: pico 110.2 ± 6.9 %, área 113.4 ± 5.0 %, n=5). El inhibidor de calmodulina W-7 ocluyó el efecto de CCPA y 2-MeSADP (W-7+CCPA, pico 113.6 ± 8.6 %, área 117.4 ± 14.2 %, n=4; W-7+2-MeSADP: pico 93.3 ± 5.6 %, área 111.7 ± 14.0 %, n=4). Los resultados sugieren que en sinapsis neuromuscular de mamífero, el efecto modulador de CCPA sobre el proceso exocitótico independiente a la entrada de Ca2+ está vinculado a la calmodulina, mientras que la acción de 2-MeSADP involucra a calmodulina y PKC. La cascada AMPc/PKA no está relacionada a la acción de ambas purinas.