INVESTIGADORES
PEREIRA Claudio Alejandro
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio funcional y de la regulación del transportador de prolina de Trypanosoma cruzi.
Autor/es:
SAYE, MELISA; REIGADA, CHANTAL; DIGIROLAMO FABIO; MIRANDA, MARIANA; PEREIRA, CA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; X Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2014
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozoología
Resumen:
En tripanosomátidos, la prolina es un aminoácido esencial dado que constituye una fuente
de carbono y energía alternativa a la glucosa. Adicionalmente, en Trypanosoma cruzi se
ha demostrado que la prolina confiere resistencia ante estrés osmótico y que sustenta la
invasión celular en tripomastigotes metacíclicos y la progresión del ciclo intracelular en el
pasaje de epimastigotes intracelulares a tripomastigotes. Asimismo se ha establecido que
la acumulación de prolina libre intracelular constituye un mecanismo de resistencia a
estrés oxidativo. En nuestro laboratorio hemos generado una cepa transgénica de T. cruzi
que sobre-expresa el transportador de prolina Tc069 (pTREX-Tc069), y hemos
demostrado, no sólo que transporta más prolina que la cepa control, sino que además una
mayor tasa de transporte se traduce en mayores niveles intracelulares de prolina libre.
También hemos evaluado la respuesta de estos parásitos ante situaciones de estrés
oxidativo y su respuesta al tratamiento con las dos drogas tripanocidas disponibles, y
hemos reportado que los parásitos Tc069 presentan mayores IC50s que los parásitos
control. Actualmente estamos estudiando la regulación del transportador de prolina en los
parásitos Tc069. Hemos observado que la tasa de transporte varía a lo largo del
crecimiento del cultivo, presentando un pico de máxima velocidad al inicio de la fase
logarítmica, y que luego decae a valores nulos al alcanzarse la fase estacionaria.
Asimismo hemos evaluado la expresión de la proteína recombinante y su localización
subcelular mediante un ?flag? durante todo el cultivo y, en concordancia con el transporte,
hemos observado que también varían de manera similar al transporte. Estos resultados
indicarían que el transporte de prolina se ve influenciado por el estado metabólico de los
parásitos, y además, se estaría evidenciando una regulación proteica post-traduccional
que llevaría a la degradación del transportador de prolina y no sólo a su inactivación.