Respuesta al daño por humo de cigarrillo en cultivos de células del epitelio pigmentario de la retina.

MARAZITA MC; DUGOUR A; FIGUEROA JM; SUBURO AM

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Oftalmología; 2014

La degeneración macular asociada con la edad (DMAE) es una de las principales causas de ceguera en todo el mundo. Las lesiones de esta enfermedad incluyen la muerte de los fotorreceptores y del epitelio pigmentario de la retina (EPR), cuya desaparición es típica de la forma seca o atrofia geográfica. La DMAE tiene un importante componente genético pero también se asocia fuertemente con el consumo de cigarrillos y ciertos factores nutricionales. Potentes oxidantes presentes en el tabaco promueven el daño oxidativo de las macromoléculas celulares. Precisamente, las señales de daño persistente en el ADN pueden inducir la senescencia celular prematura. Postulamos que la inducción de esta forma de senescencia por efecto de componentes del humo de tabaco podría contribuir a explicar la asociación de DMAE con el consumo de cigarrillos. Utilizamos la línea celular de EPR humano ARPE-19 y estudiamos la inducción de senescencia mediante la actividad de ß-galactosidasa asociada a senescencia (ß-Gal-S). Aplicamos un inductor conocido, H2O2, y comparamos sus efectos con condensado de humo de cigarrillo (CSC, Murty Pharmaceuticals, Lexington, KY), y metilglioxal (MGO, Sigma-Aldrich). Los estudios se repitieron en presencia del antioxidante N-acetil-cisteína (NAC, Sigma- Aldrich). El daño por H2O2 (150 µM) demostró que las células ARPE-19 pueden ser inducidas a senescer. Tanto la incubación con CSC (100-150 µg/ml) como con MGO (1?10 µM), produjeron un aumento dosis dependiente en el número de células positivas para la actividad de ß-Gal-S. En todos los casos, la inclusión de NAC (1 mM) en el medio de cultivo disminuyó la aparición de cambios de tipo senescente. Concluimos que las células ARPE-19 pueden sufrir un proceso de senescencia prematura asociada a estrés oxidativo provocado por CSC o MGO. Un proceso semejante podría afectar al EPR como consecuencia del tabaquismo, contribuyendo al desarrollo de la DMAE