INVESTIGADORES
MESSINA German alejandro
congresos y reuniones científicas
Título:
Desarrollo de una columna de inmunoafinidad acoplada a un sistema de flujo continuo, para la cuantificación de anticuerpos IgG específicos para Helicobacter pylori en suero humano.
Autor/es:
GERMÁN ALEJANDRO MESSINA; PATRICIA WANDA STEGE; LORENA L. SOMBRA; IRMA ESTER DE VITO; MARIA F. SILVA; LUIS DANTE MARTINEZ
Lugar:
Buenos Aires, Argentina.
Reunión:
Congreso; II Congreso Iberoamericano y IV Argentino de Química Analítica; 2007
Resumen:
Helicobacter pylori es un bacilo Gram negativo que coloniza la
mucosa gástrica humana y es el agente causal de gastritis crónica, úlcera péptica
y cáncer gástrico [1, 2]. Los anticuerpos circulantes contra H. pylori son
importantes para el diagnostico y el seguimiento del tratamiento antimicrobiano
[3].
Los anticuerpos presentes en el suero reaccionan con antígenos purificados de H
pylori inmovilizados en una columna de teflón de 3 cm. de longitud con un id de
0,8 cm., rellena con vidrio de porosidad controlado modificado con grupos amino
propil. Los anticuerpos unidos son cuantificados por un segundo anticuerpo anti
cadena γ conjugado con la enzima fosfatasa alcalina (AP). Esta enzima hidroliza
la unión fosfato monoester de p-nitrofenil fosfato, liberando p-nitrofenol
(pNP) [4], el cual fue cuantificado espectrofotometricamente a 410 nm
utilizando una celda de flujo de 100 uL La absorbancia del pNP es proporcional
a la actividad de AP y consecuentemente a la cantidad de anticuerpos
específicos para H. pylori presentes en cada muestra. El tiempo total de
análisis no excedió los 30 min. En la práctica, la columna desarrollada
permitió la determinación rápida, sensible y selectiva de anticuerpos para H.
pylori cuando fue incorporada en un sistema FIA