Estudio molecular de aislamientos de campo del Virus de la Bronquitis infecciosa aviaria

AGUSTINA RIMONDI; MARIA ISABEL CRAIG; MATEO DELAMER; ARIEL VAGNOZZI; GUIDO KONIG; ARIEL PEREDA

Vaquerías Córdoba

Otro; XXVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología; 2007

La bronquitis infecciosa (BI) es una enfermedad viral aguda, de alta morbilidad, que puede afectar  las vías  respiratorias altas,  los riñones y oviductos de los pollos. Estos cuadros tienen un impacto económico importante en la industria avícola, debido a que pueden producir una caída importante en la producción del huevo como la falta de ganancia de peso en el pollo parrillero. El agente etiológico que causa esta patología es el virus de la bronquitis infecciosa (IBV) pertenece al género Coronavirus, dentro de la familia Coronaviridae, y presenta un genoma a RNA simple cadena de polaridad positiva.  Es un virus envuelto con glicoproteínas de superficie denominadas espículas (S). La proteína S posee dos subunidades: S1 en la porción amino terminal y S2 en la carboxiterminal. En la naturaleza existen varios serotipos diferentes, los cuales poseen una protección cruzada muy pobre. La mayoría de los serotipos se diferencian en la secuencia aminoacídica de S1, donde se encuentran los epitopes neutralizantes principales. Si bien en nuestro país se utiliza la vacunación como la principal medida profiláctica, la misma no es obligatoria y se observa la aparición de brotes durante todo el año inclusive en galpones con en aves vacunadas. Por estos motivos, es necesario conocer la diversidad de IBV presente en nuestro país. El objetivo de este trabajo consiste en caracterizar molecularmente cepas aisladas de campo y determinar su relación con cepas vacunales y de referencia. Para ello se realizaron aislamientos a partir de casos de campo en huevos embrionados SPF. Se extrajo el RNA viral a partir de muestras de líquido alantoideo y de formulaciones vacunales. Luego de la realización de la retrotranscripción del ARN obtenido, se confirmo la presencia del virus mediante la utilización de primers de diagnostico específicos. Los aislamientos positivos a este ensayo fueron sometidos a una reacción de PCR utilizando tres primers diseñados específicamente para la amplificación de la región hipervariables 1 (HVR-1) y las regiones hipervariables 1 y 2 (HVR 1-2) presentes en S1. El análisis de la secuencia nucleotídica de los diferentes asilamientos mostro que si bien existen aislamientos relacionados con las cepas vacunales, otras se encuentran en grupos muy distanciados de las mismas. Cabe destacar que este es el primer trabajo realizado sobre la caracterización de aislamientos de campo de IBV de la Argentina.  Si bien sería necesario hacer pruebas de “vaccine matching” para determinar el grado de protección de las distintas cepas vacunales frente a diferentes aislamientos de campo, la diferencia nucleotídica encontrada en algunos aislamientos estudiados en el presente trabajo indicarían la circulación de variantes no relacionadas con las cepas vacunales utilizadas en nuestro país.