COMPARISON OF TWO METHODS TO EVALUATE MORPHOLOGY IN PORCINE CUMULUS - OOCYTE COMPLEXES

TELLO MF; LORENZO MS; CLAVER JA; MARURI A; LOMBARDO DM

Tandil

Jornada; PRIMERAS JORNADAS DE CIENCIAS MORFOLÓGICAS DE LAS SIERRAS DEL TANDIL; 2011

Los complejos ovocito-cumulus (COCs) son evaluados morfológicamente no solo para la investigación básica sino también para seleccionar los más adecuados a ser utilizados en diversas biotecnologías reproductivas (maduración in vitro, fecundación in vitro, producción de embriones). Tradicionalmente la evaluación morfológica de los COCs se realiza observándolos bajo lupa estereoscópica y en algunos casos utilizando tinciones de rutina, colocándolos directamente sobre portaobjetos y obteniendo una morfología poco precisa por superposición de las células del cumulus sobre el ovocito. El objetivo de este trabajo es comparar la morfología de los COCs porcinos con diversas tinciones utilizando un método convencional y un nuevo método en cortes finos empleando historresina para la inclusión. Los COCs se obtienen por punción aspiración de folículos (3-8 mm) de ovarios provenientes de faena. Son clasificados bajo lupa estereoscópica, fijados en paraformaldehído al 2 %, deshidratados con acetona e incluidos en hidroxietil-metacrilato. Se obtienen cortes de 1-2 μm seriados utilizando un ultramicrótomo y se efectúan las tinciones (H - E, Orceína). Esta técnica permite evaluar diferentes secciones de un mismo COC, no existiendo distorsión de la morfología por superposición celular. Además, un mismo COC puede ser evaluado simultáneamente por diferentes técnicas de tinción. Los grupos morfológicos establecidos por observación en fresco podrán ser caracterizados por dicho método. Esta es una técnica novedosa que puede contribuir al conocimiento morfológico de estas estructuras en diversas especies.