Identificación de mezclas antigénicas para el diagnóstico de Paratuberculosis y Tuberculosis Bovina

MON, ML; MARIANA VIALE; GABRIEL TRAVERÍA; FIORELLA ALVARADO PINEDO; DOUWE BAKKER; PETER WILLEMSEN; BERNARDO ALONSO; ANDREA GIOFFRÉ; ROMANO MARIA ISABEL

Buenos aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología y II Congreso Microbiología Agrícola y Ambiental 2013; 2013

Asociación Argentina de Microbiología

Introducción: Paratuberculosis (PTB) y Tuberculosis (TBB) son enfermedades producidas por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map) y M. bovis, respectivamente. Ambas bacterias están muy relacionadas desde el punto de vista antigénico. Para el diagnóstico de TBB se utiliza la inoculación intradérmica de PPD bovina. El diagnóstico inmunológico de PTB, por el contrario, es humoral. Objetivo: Obtener mezclas antígénicas que permitan el diagnóstico específico de estas enfermedades. Materiales y Métodos: Para el diagnóstico de TBB se estudiaron 6 antígenos de M. bovis que fueron evaluados para respuesta celular, midiendo la liberación de gamma interferón utilizando sangre de animales con TBB y con PTB. Luego de este ensayo inicial se elaboraron 2 cocteles, C1 y C2 con antígenos específicos de M. bovis para respuesta celular. Estos cocteles se evaluaron en: 1-cobayos sensibilizados con M. bovis y M. avium, 2- bovinos experimentalmente infectados con M. bovis, midiendo liberación de gamma interferón. Para el diagnóstico de PTB se evaluó la respuesta humoral de 53 antígenos por la técnica de MAPIA (múltiples antígenos printeados para inmunoanálisis). Se realizó un coctel, C3, con los más reactivos y la mezcla antigénica se ensayó en un ELISA, utilizando sueros de animales con diagnóstico de PTB confirmado por cultivo, sueros de animales sanos y animales infectados con M. bovis. Resultados: Los resultados en cobayos sensibilizados indicaron que los cocteles C1 y C2 reaccionan solo con los cobayos sensibilizados con M. bovis, indicando su especificidad. En los ensayos con bovinos experimentalmente infectados, C1 y C2 producen alta liberación de gamma interferón solo al ser ensayados con la sangre de los animales con TBB. La mezcla de antígenos seleccionados para respuesta humoral en animales con PTB, C3, fueron reconocido por 14 sueros de los 25 animales con PTB, y ninguno con TBB en MAPIA. Luego se realizó ELISA con C3 y se comparó con los resultados con PPA-3(antígeno comercial) El ELISA-PPA-3 reconoció 16 de los 25 animales con PTB (64%) pero también 12 de los 17 animales experimentalmente infectados con M. bovis (70.5%), mientras el ELISA-C3 detectó 18 de 25 animales con PTB (72%) y solo 3 de 17 animales experimentalmente infectados con M.bovis (17,6%). Conclusiones: C1 y C2 podrían utilizarse para el diagnóstico específico de TBB cuando se apliquen vacunas contra PTB que interfieren en el diagnóstico de TBB, y C3 para el diagnóstico serológico de PTB, con mayor especificidad que la del ELISA-PPA-3.