Participación del sistema melanocórtico en la regulación de la expresión de TRH en la rata SHR.

LANDA, MARIA SILVINA; PERES DIAZ, LUDMILA; SCHUMAN, MARIANO LUIS; GARASSINO, MARIA BELEN; GARCIA, SILVIA INES; PIROLA, CARLOS JOSÉ

CABA

Congreso; XXI Congreso Argentino de Hipertensión Arterial; 2014

En la regulación de la ingesta calórica y el gasto energético participan diversos sistemas de péptidos orexígenos y anorexígenos modulados por leptina, la hormona liberada por adipocitos. Hemos descripto que el efecto hipertensor de la leptina es mediado por TRH con el consecuente aumento de catecolaminas. También se ha descripto que los receptores melanocórticos participan de la respuesta presora de la leptina. Dado que aún no existen evidencias del conector fisiológico entre los efectos cardiovasculares de la leptina con el consecuente aumento de la actividad simpática, postulamos que la hipertensión inducida por leptina estaría mediada por la TRH diencefálica (TRHd) a través de receptores melanocórticos tipo 4 (MC4-R). Así,  evaluamos la participación del sistema melanocórtico en la regulación de la presión arterial (PA) en el modelo de rata SHR que presenta una hiperactivación del sistema de TRH hipotetizando que debería encontrarse aumentado respecto a las ratas WKY. Para ello, sacrificamos ratas SRH y WKY adultas, se extrajo RNA de diencéfalo a partir del cual se obtuvo cDNA para la cuantificación de la expresión de genes mediante PCR en tiempo real utilizando HPRT como control de carga. Como previamente publicamos, la expresión de TRH fue significativamente mayor en las SHR vs. WKY (0.0356±0.0064 vs 0.0273±0.0040, p<0.05, n=5). De acuerdo con nuestra hipótesis, se observaron niveles mayores de expresión de POMC en las ratas SHR en relación a las WKY (0.0431±0.0108 vs 0.0277±0.0042, p<0.05, n=5). Lo mismo fue observado al evaluar la expresión del MC4-R. Para confirmar la participación del MC4-R en la hipertensión de este modelo, realizamos inyecciones intracerebroventriculares (icv) en ratas SHR y WKY con un antagonista de MC3/4-R (SHU). Se implantó una cánula guía en tercer ventrículo que nos permitió realizar inyecciones en el animal despierto. Se registró el peso corporal, consumo de alimento y presión arterial mediante método plestimográfico (CODA System) en condiciones basales y a las 24 hs de la inyección de SHU (0.6nmol/5ul) o solución fisiológica (5ul) como control. De acuerdo a lo esperado, el SHU generó un aumento en el consumo de alimento y peso corporal respecto al basal, indicando la efectividad del tratamiento; y también disminuyó la presión media, sistólica y diastólica en las ratas SHR (# p<0.05, n=5). Los resultados se expresan como media ± ES, ANOVA, Test de Fisher.   GRUPOS CONSUMO DE ALIMENTO PAS TRH/HPRT BASAL POSTICV BASAL POST ICV WKY-SF 20.3±2.6 20.5±3.6 137.5±6.2 142.3±4.7 0.053±0.726 WKY-SHU 20.0±2.2 26.4±3.2 # 140.5±6.2 143.5±4.8 0.049±0.725 SHR-SF 22.6±1.8 20.8±2.1 219.1±5.1 227.1±3.8 1.403±0.592 SHR-SHU 21.2±2.1 28.8±2.9 # 219.4±6.2 196.9±4.7 # 0.036±0.649 *     Al evaluar la expresión de genes en diencéfalo mediante  PCR en tiempo real observamos, de acuerdo a nuestra hipótesis, que la disminución de la PA en el grupo SHR-SHU se acompañó de una disminución en la expresión de TRH respecto a SHR-SF (* p<0.05, n=5). Demostramos por primera vez que la expresión de componentes del sistema melanocórtico se encuentran aumentados en el diencefalo de la rata SHR sugiriendo un aumento en la actividad de este sistema y postulamos que la TRH mediaría la acción hipertensora del sistema melanocórtico ya que el bloqueo de receptores MC4-R disminuye la  expresion del tripéptido y reduce significativamente la PA.