Rol de la AQP2 en la regulación de la apoptosis en células renales

MP. FLAMENCO; L. GALIZIA; P. FORD; C. CAPURRO

Buenos aires, Argentina

Congreso; XXII Latin-American and I Ibero-American Congress of Physiological Sciences; 2006

SAFisiol y ALACF

El paso inicial en el desencadenamiento de la apoptosis es una salida de K+ de la célula la cual genera un gradiente osmótico que conduce a la pérdida de agua y el subsecuente achicamiento celular. A este evento se lo denomina AVD (Apopototic Volume Decrease). Pese a la importancia del AVD, poco se sabe acerca de las vías implicadas en la salida de agua. El objetivo de este trabajo fue evaluar la posible participación de los canales de agua (acuaporinas, AQPs) en el proceso de apoptosis. Utilizamos como modelo líneas celulares de túbulo colector cortical con características bien definidas: WT-RCCD1, la cual no expresa AQPs, y AQP2-RCCD1 que expresa constitutivamente AQP2 en la membrana apical. La apoptosis fue inducida incubando a las células 24 h con manitol (100 mOSM) o 7 h con cycloheximida (10 mg.ml-1). La evaluación de la misma se realizó mediante la técnica de fragmentación del ADN y la de tinción con naranja de acridina-bromuro de etidio. La permeabilidad al agua (Pf x 10-4, cm.s-1) fue medida por videomicroscopía de fluorescencia. Los resultados mostraron que ambas líneas celulares desarrollan apoptosis pero el % fue significativamente mayor en las células que expresan AQP2 (46% vs. 15%). En condiciones controles el valor de Pf de las células AQP2 fue significativamente mayor que el de las células WT (240 ± 69, n=61 vs. 4.01 ± 0.25, n=69, p < 0.001). En presencia de ambos estímulos apoptóticos ~30 % de la población celular de AQP2 mostró una marcada reducción del Pf  a valores similares a los de WT control. El mayor % de apoptosis observado en presencia de AQP2 permite proponer que la alta permeabilidad de la membrana favorece la salida inicial de agua (AVD). Luego, la reducción del Pf, podría deberse a una inhibición de la AQP2, crucial para mantener baja la concentración de K+ intracelular, fundamental para la activación de la cascada enzimática de la apoptosis