Efecto de la expresión de la aqp2 y de la isoforma nhe2 del intercambiador na/h en la proliferación de células renales.

V . RIVAROLA; J. DVORKIN; FLAMENCO P; JUAN FERNADEZ; FORD P; C . CAPURRO

Congreso; 55 Reunión anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

El control del pH intracelular (pHi), regulado por los intercambiadores Na+/H+ (NHE) y Cl-/HCO3- (AE), es necesario para una correcta modulación de los procesos de proliferación así como de muerte celular y, por lo tanto, de la homeostasis en el número de células. Por otra parte, aunque se ha visto que pacientes con acidosis/alcalosis crónicas pueden presentar trastornos de crecimiento, no es clara aún la causa. Nuestros estudios previos en células renales mostraron que la alcalosis crónica induce una disminución de la proliferación celular por arresto en la fase G2 del ciclo seguido de apoptosis y que la presencia del canal de agua AQP2 acelera e incrementa esta respuesta. El objetivo central de este trabajo fue investigar la posible participación de los intercambiadores NHE en la desregulación de la proliferación y muerte celular observados durante una alcalosis crónica. Para ello se utilizaron dos líneas celulares de túbulo colector cortical con  características bien definidas: WT-RCCD1 la cual no expresa AQPs y AQP2-RCCD1 que expresa constitutivamente AQP2 en la membrana apical, y se realizaron estudios a nivel funcional (pHi y tasa de proliferación) y molecular (western blot). Los resultados muestran que en condiciones control las células que expresan AQP2 poseen aumentada la expresión de la isoforma NHE2 del intercambiador Na+/H+ (WT vs. AQP2 en unidades arbitrarias: 0.091 +/- 0.095 vs. 0.385 +/- 0.040, p < 0.001, n=5), aumentada su actividad (WT vs. AQP2 dph/dt, 0.05+/- vs. 0.10, n=5) resultando en un pHi significativamente  mas alcalino (7.6) y al inhibirla farmacológicamente con HOE 15 um se reduce la proliferación (control vs. HOE, número de células x 104; 11 vs 7.55, p<0.001, n=10). No se observaron cambios en ningunos de estos parámetros para la isoforma NHE1. La alcalosis crónica produce un aumento de la actividad de la isoforma NHE2 solo en las células AQP2. Estos resultados sugieren que en presencia de AQP2 existe una activación diferencial de la isoforma NHE2 lo que sería relevante en la activación  de la proliferación.