La expresión de Acuaporina 2 incrementa la apoptosis en células del túbulo colector cortical.

PILAR FLAMENCO; LUCIANO GALICIA; VALERIA RIVAROLA; JUAN FERNADEZ; PAULA FORD; CLAUDIA CAPURRO

MAR DEL PLATA, ARGENTINA

Congreso; 53 Reunión anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2008

La principal característica de la apoptosis es la contracción celular, evento denominado AVD (Apopototic Volume Decrease), debido a la salida de iones K- y Cl- seguida por el agua osmóticamente ligada. Pese a la importancia del AVD, los mecanismos involucrados en esta pérdida de agua han sido ignorados. E l objetivo de este trabajo fue investigar el papel del canal de agua (acuaporina2, AQP2) durante la apoptosis en células renales, así como la posible relación entre la expresión de AQP2 y la activación de mecanismos iónicos involucrado en la respuesta reguladora de volumen. Utilizamos como modelos dos líneas  celulares de túbulo colector renal: WT-RCCD, la. cual no expresa AQPs, y AQP2-RCCD que expresa AQP2 en la membrana apical. La apoptosis fue inducida incubando a las células hasta 24h con manitol o hasta 7h con cycloheximida. La evaluación de la misma se realizó mediante diferentes técnicas (morfología celular, degradación del ADN y actividad de caspasas) y la permeabilidad al agua (Pf x 10-4,c m.s-l) fue medida por video microscopia de fluorescencia. Los Resultados muestran que independientemente del estímulo, tres hechos distinguen a las células que expresan AQP2 de las WT: 1- la tasa de apoptosis está significativamente incrementada (59.7 ± 3.4 vs 33.3 ± 2.30 p<0.05) 2- El bloqueo de canales de K. y Cl que participan regulación de volumen en estas células inhiben la apoptosis en las células AQP2 (54,60 ± 2,3 vs 22,7 ± 0,89p <0.001) y 3- El Pf es drásticamente reducido durante el proceso de apoptosis solo en las células AQP2 ( 126 ± 9,30 vs 19,92 ± 1,85;p <0.001) y esto ocurre previo a la degradación del ADN. Estos Resultados nos permiten suponer que la AQP2 actuaría como un sensor llevando a la activación coordinada de canales de K. y Cl reguladores de volumen resultando en una rápida contracción celular y un rápido alcance de los niveles iónicos necesarios para activar la cascada enzimática apoptótica.